猪附红细胞体MSG1基因的克隆及序列分析.pdf

动物医学进展。����,�����:��—���
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猪附红细胞体����基因的克隆及序列分析�
曹�薇,周�鹏,米荣升,黄�燕,秦培兰,杨晓娇,王向佩,王晓娟,石�凯,陈兆国�
�中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室�
中国农业科学院动物源性食品安全研究中心,上海��������
摘�要:为研究猪附红细胞体����基因的遗传变异特点,从上海地区�个屠宰场采集自然感染附红�
细胞体的猪血液,提取基因组���,根据�������已经发表的猪附红细胞体����基因序列�登录号�
��������.��,设计引物进行���扩增,将扩增产物连接到�����一�载体上,进行序列���定和分析。结果�
共获得了��条猪附红细胞体����基因序列,序列长度为��������,共编码���个氨基酸。同源性分析显�
示与�������中已经发表的猪附红细胞体����基因核苷酸序列相似性为��.��~��.��,氨基酸的相�
似性为��.��~��.��。����基因核苷酸序列的系统进化分析表明,上海地区猪附红细胞体分离株与�
�������登录的德国��/��分离株序列的亲缘关系较远。�
关键词:猪附红细胞体;����基因;克隆;序列分析�
中图分类号:����.���文献标识码:��文章编号:����—������������—����—���
猪附红细胞体�����������������主要寄生于�遗传变异规律,本研究从上海�个区的�个屠宰场�
猪红细胞表面,可引起猪的附红细胞体病,该病在世�采集新鲜血液样本,提取基因组���,扩增�����
界范围内存在,可导致患猪的急性感染或慢性感染,�基因,进行克隆测序,对获得的序列进行遗传变异情�
主要表现为贫血、黄疸、发热等症状,降低猪的生产�况分析,为进一步利用����蛋白进行附红细胞体�
性能,常与其他病原混合感染,发病率低但病死率�黏附、致病机制研究奠定基础。�
高,病愈后的猪可终生携带病原,给养猪业造成很大��材料与方法�
的经济损失,也是一种重要的人兽共患病病原���。�
�.��材料�
黏附到宿主红细胞表面是附红细胞体致病的关键步��.�.��附红细胞体感染猪血液样品�猪血液样品�
骤���,�����������等��通过对猪附红细胞体基因组�分别采自上海市长宁区、松江区和嘉定区某屠宰场,�
文库进行测序,发现了猪附红细胞体�一磷酸甘油醛�以柠檬酸葡萄糖�����为抗凝剂,采集新鲜猪血液,�
脱氢酶样蛋白���. �������������������一�一����—�血液:抗凝剂为�:��。经����—��������检测为�
�������������������—��������������,�����编码基�附红细胞体感染阳性者用于试验,共计��份。�
因,利用原核表达系统获得了该基因的重组表达蛋��.�.��酶及试剂�������聚合酶、�����、�
白,进一步研究发现����蛋白存在于猪附红细胞��������������������、�����一�载体购自于宝生�
体表面,在附红细胞体黏