高效液相色谱法测定双黄连注射剂中黄芩苷的方法分析.doc

双黄连注射剂是近年来研制的中药制剂,在临床上主要用于急性上呼吸道感染、急性支气管炎、急性扁桃腺炎、肺炎及急性尿路感染等,其疗效确切,安全,应用十分广泛。双黄连注射剂由金银花、黄芩、连翘3味中药提取制成,主要成分为黄芩苷、绿原酸、连翘苷等[1]。药理学研究已证实黄芩苷具有抑菌、清热、降压、镇静、利尿、利胆、抗炎、抗变态反应、解毒等作用;绿原酸具抗菌消炎、清热解毒等作用;而连翘苷则具有较强的抑菌、抗病毒的活性。双黄连注射剂黄芩苷含量测定的方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法、紫外分光光度法等,高效液相色谱法具有分离效能高、分析速度快且精准等特点,适合中药成分的多样性及复杂性,在双黄连制剂的质量控制上应用也最多。本文通过优化色谱条件测定黄芩苷的含量,以期为进一步研究双黄连注射剂中绿原酸及其它成分打下基础,为双黄连注射剂工艺研究和质量控制提供理论基础。 1仪器与试剂 (美国Agilent公司);TU-1800紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责公司);KQ-100型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);电子天平(上海精科天平);予华SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(河南省巩义市英峪予华仪器厂);Diamonsil(钻石)C18色谱柱(5μm,×::8011571DikmaTechnologies)。 (批号Z23021166黑龙江乌苏里江佳大制药有限公司);黄芩苷化学标准品(批号110715-200514,中国药品生物制品检定所);色谱甲醇(天津大茂化学试剂厂);分析纯甲醇(天津市北方天医化学试剂厂);磷酸(河北省保定化学试剂厂)。 2方法与结果 (钻石)C18色谱柱(5μm,×150mm),流动相为A-甲醇(色谱纯):B-蒸馏水(50∶50),,检测波长为326nm,进样量20μl。其分离色谱见图1~2。 ,用甲醇(分析纯)定容至刻度,超声至其完全溶解。,低温储存。 ,用甲醇(分析纯)定容至刻度,超声10min使溶解。,扭紧塞子。 ,1,2,4,6,8ml分别至10ml容量瓶中,用甲醇(分析纯)定容至刻度,,,,,,,,扭紧塞子。按上述色谱条件进行测定,每个浓度的黄芩苷标准液测3次。根据3次峰面积的平均值,求黄芩苷的标准曲线。结果见表1,~。回归方程为Y=-,r=。