黑心菊丛生芽诱导.doc

黑心菊丛生芽诱导摘要本试验是利用黑心菊(Rudbeckiahirta)的花芽为外植体,设计二组诱导培养基。,设计不同的6-BA浓度(、、)。另一组控制6-,设计不同的NAA浓度(、、),比较不同的NAA/6-BA比值下愈伤组织的生长及丛生芽诱导情况。结果显示NAA/6-BA为1时愈伤组织生长情况最好而且分化出丛生芽。在继代培养过程中再一次证实该比值较适合黑心菊丛生芽的诱导。关键词黑心菊花芽组织培养愈伤组织继代培养前言植物组织培养技术是利用植物细胞的全能性理论即植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息,从而具备发育成完整植株的遗传能力。在人工控制条件(无菌环境和适宜的外界条件)下将植物体的任何一个部分,器官(如根尖、茎尖、花、叶、种子、果实等)、组织(如薄壁组织、分生组织)、细胞(单个细胞、细胞团等)或原生质体(如脱壁后仍具有生活力的原生质体)进行离体培养,诱导出愈伤组织、不定芽或不定根,最后使之发育成完整植物体的过程植物组织培养技术是从二十世纪发展起来的,至今已有100多年的历史,如今已成为生物工程技术领域中的一个重要组成部分,因该技术不仅具有遗传性状相对稳定,产量高,品质好,繁殖系数大,增殖快而且受季节、气候等外部大环境影响较小的特点,而且又便于操作节省人力。至今世界各国在育种、植物脱毒、无性繁殖、植物次生代谢产物生产和种质保存等方面都广泛的应用该技术。黑心菊(Rudbeckiahirt),属菊科金光菊属,是原产于美国东部的景观花种,花期5-9月。株高一般在60-100cm之间,头状花序8-9cm,重瓣花,舌状黄色花。近根出叶,叶粗糙互生,长椭圆形至狭披针形,长10-15cm,叶基下延至茎呈翼状,羽状分裂,5-7裂,茎生叶3-5裂,边缘具稀锯齿。茎较粗壮,被软毛,稍分枝,具翼。属多年生草本,陆地适应性很强,抗寒耐旱,不择土壤,极易栽培,是园林栽培的优良种。(右图为黑心菊图):黑心菊(Rudbeckiahirta),:锥形瓶、移液管、微量移液器、量筒、烧杯、玻璃棒、电子天平、电磁炉、高压灭菌锅、超净工作台、酒精灯、培养皿、镊子、剪刀、解剖刀、棉塞、牛皮纸、乳胶圈、记号笔、pH试纸等。:MS培养基母液、激素母液、琼脂、蔗糖、75%酒精、无菌水、%:以MS培养基为基本培养基,其特点是无机盐浓度高,具有高含量的氮、钾,尤其硝酸盐的含量较高,同时还含有一定数量的铵盐。这使得它的营养丰富,不需要添加更多的有机附加物,就能满足植物组织对矿物质营养的要求,而且有加速愈伤组织和培养物生长的作用,当培养物久不转移时仍可维持其生存。配六种培养基,配方如下:(1)MS++6-;(2)MS++6-;(3)MS++6-;(4)MS++6-;(5)MS++6-;(6)MS++6-