甲醇乙醇丙酮乙醚氯仿.ppt

仪器分析供药学类、中药学类、制药工程及相关专业使用全国普通高等中医药院校药学类专业“十三五”规划教材(第二轮规划教材)第十二章经典液相色谱法(LC)经典液相色谱法LC第五节聚酰胺色谱法基本原理应用聚酰胺色谱法以聚酰胺为固定相的色谱法叫做聚酰胺色谱法。聚酰胺是由酰胺聚合而成的一类高分子化合物。锦纶-6和锦纶-66是两种最为常用的色谱用聚酰胺,它们的亲水亲脂性能都好。既能分离极性物质,又能分离非极性物质。聚酰胺可溶于浓盐酸、甲酸,微溶于乙酸、苯酚等溶剂,不溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、氯仿、苯等常用溶剂;对碱较稳定,对酸特别是无机酸稳定性差,温度高时更敏感。一、基本原理聚酰胺色谱的分离机制表现为两个方面。(一)氢键吸附聚酰胺分子内的酰胺键可与酚类、酸类、醌类、硝基化合物形成氢键吸附作用。例如酚类(包括黄酮类、鞣质等)、酸类化合物的羟基与酰胺基的羰基形成氢键,芳香硝基化合物、醌类化合物的硝基(或醌基)与酰胺键的游离胺基形成氢键。吸附作用的大小与形成氢键能力的强弱有关,通常在水中形成氢键的能力最强,在有机溶剂中较弱,在碱性溶液中最弱。图12-,吸附能力越强。,例如间位、对位酚羟基使吸附力增大,邻位使吸附力减小。、共轭双键越多,吸附力越大。。(二)双重色谱有许多现象难以用氢键吸附解释,如对萜类、甾类、生物碱等也可以用聚酰胺分离;又如黄酮苷元与苷的分离,若以甲醇-水作流动相,黄酮苷比其苷元先被洗脱,而用非极性溶剂作流动相,结果恰恰相反。聚酰胺分子中既有亲水基团又有亲脂基团,当用极性溶剂(如含水溶剂)作流动相时,聚酰胺中的烷基作为非极性固定相,其色谱行为类似于反相分配色谱,因黄酮苷的极性大于苷元,所以黄酮苷比苷元容易洗脱;当用非极性流动相(如三氯甲烷—甲醇)时,聚酰胺则作为极性固定相,其色谱行为类似于正相分配色谱。黄酮苷元的极性小于黄酮苷,因而黄酮苷元易被洗脱。此即双重色谱。双重色谱只适用于难与聚酰胺形成氢键或形成氢键能力弱的化合物,如萜类、甾类、生物碱、糖类、某些酚类、黄酮类、酸类等。二、应用聚酰胺色谱按其操作形式可分为柱色谱和薄膜色谱。可分离黄酮类、酚类、有机酸、生物碱、萜类、甾类、苷类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等物质。