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TRIpure Reagent总RNA抽提试剂操作方法及步骤说明书.doc


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TRIpureReagentTRIpureReagent总RNA提取试剂目录号:RN01试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成(RN0101)(RN0102)TRIpure(4℃避光)50ml100ml储存事项:TRIpure在室温下能稳定保存12个月。尽管如此,为达到最佳效果,我们建议保存在2~8°C的环境下。重要提示:本品中含有苯酚,具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品,如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触,应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。注意事项:样品用TRIpure匀浆后,如果不即刻加入氯仿之前,,置于-70°C下可放置一个月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短,容易降解,建议提取后尽快进行后续实验,如反转录成cDNA,NorthernBlot等。若下游实验对DNA非常敏感,建议用RNasefreeDNaseI(货号:RN45)对RNA进行处理。自备试剂:氯仿、异丙醇(新开封或提取RNA专用)、75%乙醇(用DEPC处理过的水配制)、RNasefreewater或者DEPC处理过的水。本公司生产TRIpureReagent质量优异,可以完美替代Invitrogen的TrizolReagent。提取质量和下游实验完全一样。已经销售8年数万瓶。从无质量问题。客户如果购买本公司TRIpureReagent证明不能替换Invitrogen的Trizol,无条件退货,并3倍销售价格赔偿。RNA抽提操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)提示:用TRIpure抽提RNA时要戴手套和护眼罩。避免接触皮肤和衣服。在化学通风橱完成操作。避免呼吸道吸入。如无特殊说明,所有的操作应该在在15~30°C的室温条件下。匀浆植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIpure中迅速研磨,每50-100mg组织加入1mlTRIpure,混匀。注意:样品体积一般不要超过TRIpure体积的10%。动物组织:取新鲜或-70℃冻存动物组织尽量剪碎,每30-100mg组织加入1mlTRIpure,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIpure1ml混匀。注意:样品体积一般不要超过TRIpure体积的10%。单层培养细胞:。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的TRIpure量(每10cm2加1ml)。当TRIpure量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。注意:贴壁培养细胞往往不能完全从培养瓶(皿)脱落,这并不意味着裂解不完全,此时细胞膜实际已经完全破裂开,并已释放出全部RNA,继续做即可。细胞悬液:离心收集细胞。在TRIpure试剂中用移液管反复吹打来裂解细胞。每5~10×106的动物细胞,植物或酵母菌细胞或每1×107细菌加1ml的TRIpure。在加入TRIpure前应避免洗涤细胞,因为那样会增加mRNA降解的可能性。破裂某些酵母菌和细菌可能需要使用匀浆器。血液:推荐使用本公司的TRIpureReagentLS(货号:RN02),这是全血或者液体样品专用的TRIpureReag

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  • 时间2019-02-28