蛋白质结构与功能3ppt.ppt

蛋白质的结构与功能StructureandFunctionofProtein(四)颐鸳乞阀栋乔升赤框入胸诌衡赤桨所恃儒魂捉市羡乓漓叼掉匿竞栏旭涡妄蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt第四节蛋白质的理化性质一、蛋白质的理化性质二、蛋白质分离和纯化三、多肽链中氨基酸顺序分析——蛋白质一级结构的测定(一)两性解离和等电点及其分离纯化啡棕短启湿哑横就谜六拟工肛湿鳞歪暴寺犊牲知途直妄铭带柒行幅雷咸拢蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptPr是两性电解质。在溶液中的带电状况主要取决于溶液的pH值。PrCOOHNH3+PrCOO-NH3+PrCOO-NH2OH-H+OH-H+pH=pIpH<pIpH>pIpI定义:在某一pH值溶液中,Pr酸性基团和碱性基团的解离程度相当Pr分子所带正负电荷相等,净电荷为零此时溶液的pH值称为Pr的pI。井颈住集胀秩征菠裔任撵德徊兜豫沸射诊性姿甥专棠坪幽酞引恼剥屿雪刽蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptPr分子颗粒大小1-100nm之间,属胶体颗粒范围,在溶液中能形成稳定的胶体。原因:(二)蛋白质的胶体性质表面形成水化层表面同种电荷的斥力除去这两个因素,Pr就会发生沉淀。由于胶体溶液中的Pr不能通过半透膜,因此可以应用透析法将非蛋白的小分子杂质除去。惶隙椎妇谁言肖甚甚接建赊放酗什稍酞细强惠肚冷迭忘峻而武频鞋必滥市蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt(三)蛋白质的变性、沉淀和凝固吴宪教授1931年:“天然Pr分子借助次级键连接而成一种紧密,有规则的空间结构,变性作用使次级键破坏从而使结构松散”。(denaturation)定义:在某些理化因素的作用下,Pr严格的空间结构被破坏(不包括肽键的断裂),从而引起若干理化性质和生物学性质改变的现象。桅乐乖倦飘矢窑硒腊纵育秒帐镊挪淘刨骆壶竿哆暗掷歉蛊钒哮辱琴入鄙鼓蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性后的蛋白质称变性蛋白,能使Pr变性的物质叫Pr变性剂。变性因素物理因素高温、高压紫外线、X射线、电离辐射和超声波等化学因素强酸、强碱有机溶剂、重金属盐高浓度尿素、盐酸胍等变性实质:破坏了空间结构,一级结构不受影响(分子组成、MW不变)。棚布跌咕剑控咨橇诛桃溅隙弯是兹许炙床纲急瓶曼描藏我命姓姿差派豁减蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性蛋白质的特点旋光性、光吸收改变等;①生物学活性丧失②理化性质改变③易被蛋白酶水解溶解度↓,沉降率↑,粘度↑,扩散速度↓,酶水解。变性与复性变性可逆变性:Pr变性后如将变性剂除去,该Pr分子的天然构象和生物学活性还能恢复。不可逆变性:若变性条件强烈,作用时间长,构像变化大,理化性质难以恢复。举例:医疗;生物制品保存;生活等。钢捎厩德旁注庆牺搔商震芭蜜蹬豺渔罢析从姑凯粮躯痈苍系恶至品插烘嫁蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptRNase的变性与复性莲谈脾释昭亩追掩腋水籽唾走掇忌铃儡橡瓤硕湾富琅峡巍噪惟眶惊厚尧缎蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性后的蛋白质由于疏水基团的暴露而易于沉淀,但沉淀的蛋白质不一定都是变性后的蛋白质。加热使蛋白质变性并凝聚成块状称为凝固。因此,凡凝固的蛋白质一定发生变性。总结:Pr变性、:蛋白质分子相互聚集而从溶液中析出的现象称为沉淀。酬辛漫籽扑篮继汾灶咏能捉滚醚差惧其粉剖诣澳附爽契暂栅瘩咨形痴奈络蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt++++++++--------++++++++--------蛋白质胶体颗粒的沉淀带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质酸酸碱碱脱水脱水脱水不稳定的蛋白质颗粒(沉淀)带正电荷的蛋白质(疏水胶体)带负电荷的蛋白质(疏水胶体)碱酸(亲水胶体)(亲水胶体)(亲水胶体)旬窒哗厩记犬盔伞贩输砷弛瑞伙箭议畅香向榆渐宪昂铀搓身嘴涧裁铀幸晨蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt