实验室标准操作规程.ppt

实验室的标准操作规程(SOP)水产品和畜、禽肉中氯霉素残留量检验方法气相色谱法-质谱检测法1方法提要根据方法进行验证修改后,并依据欧盟指令建立了质谱测定条件,将某些关键步骤进行细化。本方法适用于水产品和畜、禽肉组织、肠衣中氯霉素残留确证检测。用乙酸乙酯提取,提取液用正己烷净化,硅烷化后用气相色谱配有负化学源的5973N质谱检测器检测。实验室的标准操作规程(SOP)气相色谱法-:配有负化学源的5973N质谱检测器。:5810型,Eppendorf公司。:T25型,18G刀,:R-200,BUCHI公司。:200μL、1000μL、5000μL,Eppendorf公司。:15mL、50ML。:39760型,Thermolyne公司。实验室的标准操作规程(SOP)气相色谱法-(有机试剂需重蒸馏),水为去离子水。。。。。:经650℃灼烧4h,置于干燥器内备用。:SylonBFT{99%N,O-双(三甲基硅烷)三氟乙酰胺(BSTFA)+1%三甲基氯硅烷(TMCS){美国Supelco产品,货号33154-u,}。实验室的标准操作规程(SOP)气相色谱法-(chloramphenicol):纯度≥99%,Amresco分装,上海生工生物工程有限公司和Sigma公司。,用甲醇溶解,并定容至刻度,混匀,浓度为1mg/mL,4℃保存6个月。:取1mL储备液用甲醇溶解定容到100Ml,此时浓度为1μg/mL,取1μg/mL1mL定容至10mL,;取1μg/,。实验室的标准操作规程(SOP)气相色谱法-,经充分混匀。用四分法缩分出不少于500g试样,混匀,均分成两份。装入清洁容器内,加封后,表明标记。()试样于50mL离心管中。加入25mL乙酸乙酯,用均质器均质提取2min,4000r/min离心3min。将乙酸乙酯层移入50mL鸡心瓶中,试样再加入5mL乙酸乙酯,涡流混匀器混匀1min,合并乙酸乙酯提取液,于40℃旋转蒸发至近干。加入1mL甲醇溶解残渣,再加入20mL4%氯化钠溶液和15mL正己烷,用涡流混匀器混合1min,4000r/min离心3min。弃去正己烷层,水层加15mL正己烷,同上操作,弃去正己烷层。水层中加入15mL乙酸乙酯,用涡流混匀器混合2min,3000r/min离心3min。吸取乙酸乙酯层,通过无水硫酸钠柱(5g)脱水于另一个50mL鸡心瓶中,用少量乙酸乙酯淋洗无水硫酸钠柱。于40℃旋转蒸发至约1mL。实验室的标准操作规程(SOP)气相色谱法-,用1mL乙酸乙酯洗涤鸡心瓶,合并乙酸乙酯。于40℃吹氮气蒸发至干。加入100µL正己烷和100µL硅烷化试剂,于70℃烘箱中加热30min。吹氮气蒸发至干,(6:4),混匀溶解,供气相色谱测定。)色谱柱:30m××µm,HP-5MS; c)PTV进样口温度:70℃()700℃/min250℃()700℃/min300℃;d)载气:氦气,恒压模式,柱头压10psi;e)进样量:2uL实验室的标准操作规程(SOP)气相色谱法-)传输线温度:280Cb)溶剂延迟:5minc)离子源温度:150Cd)四极杆温度:100Ce)反应气:甲烷,流量:2ml/minf)选择离子监测目标物监测离子 氯霉素 466,468,470,376其中定量离子为466,定性离子为468,470,376g)离子停留时间:60毫秒实验室的标准操作规程(SOP)气相色谱法-,用氮气吹干,加入200µL正己烷和100µL硅烷化试剂,于80℃烘箱中加热30m