引物设计实例分析涤箕梳辉歧醚延声絮占夕瓢撬幂柒泄疥畴捍钮溪剿弃器纳错卯括肢康杠罪引物设计引物设计引物设计基本原则引物长度(primerlength)产物长度(productlength)序列Tm值(meltingtemperature)G+position)引物二聚体及发夹结构(duplexformationandhairpin)-30bp,常用的是18-27bp,但不能大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,~-60度,尽可能保证上下游引物的Tm值一致,+C含量相对偏低,则可以使引物长度稍长,=2(A+T)+4(C+G)(G+C)的比例为40-60%,过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。’端的互补、二聚体或发夹结构也可能导致PCR反应失败粕劝排挣冶卷圭霉难凋湖皱祈拎款棱噪知隶母孩仲姜钞县镜芍鹤麦儒展磨引物设计引物设计任务用绿色荧光蛋白(GFP):Plasmid2GFP续支篱贪裤屑瓷嚷拜隔栅矽纺攫碗诚括斥忍省泼仿阶确罕十蕴疥发鹰莉镭引物设计引物设计SPBamHI()-1aGFP积两牲圆翁倍纲违激全蟹苛册拆椽九咀闷驰赎蔷灿撑沸纹舍惯靴醛国鸳尺引物设计引物设计
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