小麦粉破损淀粉淀粉酶法.doc

G_0384小麦粉破损淀粉α-G_0384小麦粉破损淀粉测定法α-。-淀粉酶的敏感性大大高于未破损淀粉,在常温下能被α-淀粉酶降解生成糊精和一定量的还原糖。利用此特性,在规定的条件下,用α-淀粉酶降解小麦粉中破损淀粉,再用铁氰化钾法测定其还原糖量,并根据法兰德的经验公式计算小麦粉中的破损淀粉值。,水为蒸馏水;,加入3mL冰乙酸,再用水稀释至1000mL,±;,再稀择至1000mL;α-淀粉酶液称取活性相当于15000±1500A的α-淀粉酶制剂溶于500mL提取液中,再加入500mL缓冲液,α-淀粉酶活性测定见附录A(补充件)α-淀粉酶活性测定。此溶液用时现配;10%(V/V)硫酸溶液;12%钨酸钠溶液;.0g无水碳酸钠溶于1000mL水中,贮于棕色瓶避光保存;乙酸盐溶液70g氯化钾和40g硫酸锌溶于水中,加入200mL冰乙酸,再用水稀释至1000mL;10%碘化钾溶液;1%淀粉溶液;(含5个结晶水),贮于棕色瓶避光保存,一星期后标定其浓度;酸洗石英砂。:φ25×220mm;量筒:50mL;25mL;恒温水浴:可控温30±℃;秒表;加液器或移液管:2mL;10mL;移液管:5mL;玻璃漏斗及中速滤纸;电炉;锥形瓶:100mL;滴定管:10mL;天平:;;pH计或精密pH试纸:±。%,淀粉含量为68%~72%,±。如果淀粉含量过高或过低时,则称样量应按式(1)计算:称样量(g)=………………………(1)式中:P--100g试样中蛋白质的克数(含氮量×);M--100g试样中水分的克数。,加入1小勺酸洗石英砂,混匀并将试样摇松倾斜于试管底部,准确量取46mL已预热至30℃的α-淀粉酶液,先将少许α-淀粉酶液加入试样中并尽量摇匀,立即计时,再加入其余α-淀粉酶液,加盖试管并上下颠倒摇动约30次使试样均匀悬浮。迅速将试管浸入30℃水浴中,然后每隔10min取出试管,上下颠倒摇动10次使试样重新均匀悬浮,恒温酶解刚好60min时,取出试管,立即加入2mL10%硫酸溶液,充分混匀后,再加入2mL12%钨酸钠溶液,摇匀并放置约2min后,用中速滤纸过滤。舍去最初几滴,收集滤液于干净锥形瓶中,此滤液即为试样测定液。另取一支试管不加小麦粉试样,同时同上操作,所得滤液即为空白对照液。,,混合后将试管浸入剧烈沸腾的水中(可将试管置于铁丝笼架放入铝锅煮沸的水中,每次可同时作多个样品的测定),继续加热待水再沸腾后开始计时,准确反应20min后,取出试管立即置流水冷