现代生物技术导论.docx

详述发酵过程中监测的各项参数?(PPT)实验室从自然界中分离得到1株产蛋白酶的细菌菌株,试设计试验分离纯化该蛋白酶。(有,自己总结写话)(下面有个可供参考)什么是植物组织培养,详述植物组织培养常见问题和对策。答:在含有营养物质及植物生长物质的培养液中,培养离体植物组织(器官或细胞)并诱导使其长成完整植株的技术。器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织,如形成层。薄壁组织。叶肉组织。胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。问题级对策1污染问题及对策 。造成污染的原因很多,如外植体的种类、取材的季节、时间、预处理方法、消毒药剂的种类、浓度、消毒时间以及消毒方法、培养基和器皿灭菌、操作人员、工作环境的要求、超净工作台的工作质量等都与污染密切相关。一般来说,组培污染源分为3大类:材料带菌、接种污染、培养过程感染。 、取材的季节、时间、初代接种选取大小适宜的外植体。在组培中应选取带菌较少或不带菌体的材料作为外植体。对母株预处理,改善植株栽培环境,对母株喷布杀菌剂或抗生素。改变灭菌方法,使用真空减压灭菌、多次消毒灭菌、混合消毒液、灼烧等。在培养基中加入其它抑菌剂。切分潜在的带菌材料时,要保证所用的接种工具已经过彻底的消毒;继代培养时确保污染的材料应给予丢弃。针对接种污染,要做到紫外灯接种室消毒,清洗超净工作台;接种工具、材料不要与酒精灯、超净工作台铁网面、台面接触;接种人员接种时用酒精棉擦手或用浓度为75%的酒精喷洒双手,接种时应穿上无菌的白大衣,戴上帽子和口罩;无菌室要注重平时除湿和熏蒸消毒工作。培养过程中要定期对培养室进行消毒处理,及时清除污染材料,污染的材料及仪器必须经过药液消毒后方可使用。2褐化问题及控制措施 ,外植体在诱导脱分化或再分化时,自身组织由其表面向培养基释放褐色物质,以致培养基逐渐变成褐色,外植体也随之进一步变褐而死亡的现象。褐化一般分为2种:由于细胞受胁迫或其它不利条件影响所造成的细胞死亡而形成的褐化现象;由于酚类物质被多酚氧化酶氧化所引起的褐化。影响褐化的因素一般与基因型、外植体情况、培养条件、培养基有关。如温度对褐化影响很大,高温能使多酚氧化酶的活性提高,促进酚类氧化;而低温可以抑制酚类化合物的合成,降低多酚氧化酶活性,减少酚类氧化,从而减轻褐化。,使外植体处于旺盛的生长状态,可大大减轻褐变。在植株的一定部位取材,使材料中酚类物质含量较低,也有助于减少褐化。对母株进行遮光处理,不仅利于初代培养物的萌发,还可减轻褐化程度。利用硫代硫酸钠、植酸、抗坏血酸等抗氧化剂、活性炭等吸附剂能够阻止多酚氧化物对酚类物质的氧化作用,可减少或减轻褐变。实验证明,琼脂量的减少、较低的pH值也有利于减少褐变。选取适宜的培养条件如适度的低温、初培暗光或弱光培养可抑制酚类的氧化,采用45℃以上的短时间高温处理也能使多酚氧化酶失去活性,达到抗褐变的目的。3玻璃化现象及解决途径 “玻璃化现象”内涵及发生原因玻璃化现象是指在培养过程