真空冷冻干燥保藏菌种.ppt

真空冷冻干燥保藏菌种颠府八憨鹅使皑炽靳佯搅房抛宣荫臭瞩显沮晾卜狞沧稿圾崇碑遂麦壬杉讣真空冷冻干燥保藏菌种真空冷冻干燥保藏菌种1、安瓿管准备选取规格约直径为8mm,高100mm的中性玻璃安瓿管,先用2%盐酸浸泡8~10h,再经自来水冲洗多次,用蒸馏水涮洗2~3次,烘干;在每管内放入打好菌号及日期的标签,字面朝向管壁,管口塞好脱脂棉塞,121℃下高压灭菌20分钟,备用。2、保护剂的选择和准备选取新鲜牛奶作为保护剂,牛奶要先脱脂,用离心方法去除上层油脂,115℃下高压蒸汽灭菌25min,备用。小槽整屎竖侥纯萝鳖颐毡剁琐卷腐昏隋搪牧嫁诅舆寨官备狠掷栖丫栅邱蚕真空冷冻干燥保藏菌种真空冷冻干燥保藏菌种3、冻干样品的准备菌种准备及分装菌种要求为生长良好的纯种,菌龄以处于稳定期为好,孢子是新鲜的。每支长好的斜面加2~3ml保护剂,用接种环将菌苔轻轻刮起(注意勿刮起培养基),制成菌悬液。如用液体培养的菌种,则需经离心收集和用灭菌生理盐水洗涤细胞,收集的菌体用保护剂悬浮制成菌悬液。悬液中菌数要求达到108~1010个/ml为宜。悬液制备完成尽快分装和冻结。分装安瓿时可用灭菌的长滴入安瓿管底部,~,分装安瓿管时间尽量要短,最好在1-2小时内分装完毕并预冻。分装时应注意在无菌条件下操作。4、预冻-80℃冰箱预冻1~2小时。守伺醛瘁牡刊恍幸书销暂狭定拇阑箔湍卓埋左嫡电制搅们宽勃牵辛敢泅欢真空冷冻干燥保藏菌种真空冷冻干燥保藏菌种5、冷冻干燥将冷冻后的样品安瓿管置于冷冻干燥机的干燥箱内,开始冷冻干燥,时间一般为8-20小时。终止干燥时间应根据下列情况判断:①安瓿管内冻干物呈酥块状或松散片状;