食管鳞癌组织芯片中MTA1蛋白表达的免疫组织化学研究.doc

食管鳞癌组织芯片中MTA1蛋白表达的免疫组织化学研究
P"CLEAR:both"作者:钱海利,李云峰,于静,宋崇文,吕宁,张雪燕,梁萧,付明,林晨
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STRONG【摘要】/STRONG目的研究食管鳞癌组织中转移相关基因MTA1蛋白定位及表达水平的改变及与食管鳞癌进展、转移的关系。方法应用食管鳞癌组织芯片通过免疫组织化学染色研究MTA1蛋白在食管癌中的表达情况。结果MTA1蛋白在食管鳞癌组织中主要定位于胞核,在淋巴结转移灶中出现胞浆与胞核同时着色。正常组织与重度不典型增生、原位癌及癌组织之间差异有统计学意义,在食管鳞癌不同进展阶段的组织中MTA1表达逐渐升高,并且出现异位表达。结论MTA1与食管鳞癌的侵袭和转移高度相关,在食管鳞癌的fazhan发展过程中可能发挥着重要作用,可作为判断食管癌侵袭及转移能力的辅助因子。
STRONG【关键词】/STRONG食管鳞癌;MTA1;转移;组织芯片
在肿瘤细胞的生物学特征中,以侵袭性和转移性最为关键,也是恶性肿瘤的最重要标志,因此,对肿瘤转移机制及Medicine治疗方法的研究显得十分迫切。
MTA1是一个在肿瘤转移过程中表达上调的基因。它是Toh等用差异cDNA文库扫描技术从高转移大鼠乳腺腺癌细胞系中发现的,随后用同源方法发现了人的同源MTA1基因[1]。该基因产物是核小体重塑与脱乙酰基复合体(plex,NuRD)的成分,通过影响染色质的状态来调控基因转录[2]。Toh等研究还发现,MTA1在食管癌中的表达与其H4组蛋白的脱乙酰基活性相关[3]。经典的抑癌基因如p53、p21和Rb基因都受组蛋白乙酰化的调控[4]。高表达MTA1mRNA的肿瘤细胞侵袭与淋巴结转移率明显升高。有鉴于此,我们对食管癌中的MTA1蛋白表达进行研究,确定MTA1基因在食管鳞癌中表达情况,以及该表达水平与肿瘤临床行为的相关性,为进一步探讨其在食管癌转移过程中的可能分子机制打下基础。
STRONG1材料与方法/STRONG

羊抗人MTA1多克隆抗体(SantaCruz,sc9446)HRP标记羊抗鼠IgG(北京中山生物公司,ZB2305)

食管癌组织芯片由中国医学科学院肿瘤Medicine医院病理科吕宁教授提供。芯片共包含72例食管鳞癌患者的组织样本,就诊时间为2002~2003年。其中癌旁正常鳞状上皮组织67例,重度不典型增生组织42例,侵袭性癌组织70例,淋巴结转移癌组织20例。

组织标本石腊包埋切片,常规脱腊至水;()进行抗原修复;1∶200稀释一抗,37℃作用1h;生物素标记的二抗IgG,37℃孵育30min;加HRP(辣根酶过氧化物酶)标记的链霉卵白素37℃作用30min;冲洗后DAB显色复染封片。

[5]所述。最终评分范围为0~12分。我们将最终评分8~12定义为强表达,4~8为中等表达,0~4为弱表达。
:(a)阳性,组织中细胞浆着色的细胞数≥20%;(b)阴性,组织中上皮细胞或肿瘤细胞的细胞浆着色数20%。

实