10呋喃西林快速检测试剂盒说明书.doc

2010-01版
呋喃西林代谢物(SEM)快速检测试剂盒说明书
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测水产和鸡肉等组织样本中的SEM,在微孔条上预包被上偶联抗原,利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行的,样本中的SEM和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗呋喃西林代谢物的衍生物抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样品中的SEM含量与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出呋喃西林代谢物含量。
二、试剂盒技术指标:
试剂盒灵敏度:
样本检测下限:
组织(鸡/鸭/猪/牛/羊/鱼/虾肉)—---——
肝脏(鸡/鸭/猪/牛/羊肝脏)--------———
蜂蜜、牛奶、肠衣--------------------------—
鱼/虾等水产品组织因存在一定的干扰,
交叉反应率:
呋喃西林代谢物————————— 100%
呋喃它酮代谢物—————————﹤%
呋喃妥因代谢物——————————﹤%
呋喃唑酮代谢物—————————﹤%
回收率:
组织、肝脏……………………………90%±15%
蜂蜜、牛奶、肠衣……………………80%±15%
三、试剂盒组成
微量测试孔:每条8孔,一板12条
标准液X6瓶:(1ml/瓶)0ppb、、、、、
酶标记物 12ml………………红色帽
抗体工作液 7ml……………蓝色帽
底物A液 7 ml………………白色帽
底物B液 7 ml ……………黑色帽
终止液 7 ml ……………黄色帽
20X浓缩洗涤液40 ml……………白色帽
2X浓缩复溶液 50 ml ……………透明帽
衍生化试剂 10ml ……………白色帽
四、所用仪器、试剂
具备的仪器:微孔酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平()
微量移液器:单道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道250µl
试剂:氢氧化钠、乙酸乙酯、正己烷、浓HCl、磷酸氢二钾(所有样本使用)、亚硝基铁氰化钾()5·NO·3H2O)、ZnSO4·7H2O (奶样专用)
五、样本前处理步骤
样本处理前须知
处理任何样本时,都必须注意:
(a)本试剂盒所检测的组织样本包括:动物组织、禽类和水产组织。eg:鸡、鸭、牛、兔、鱼、虾等。
(b)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
(c)实验之前须检查各种实验器具是否干净,
必要时可对实验器具进行清洁,以避免污染
干扰实验结果。
样本前处理需配制:
配液1:用去离子水将2×浓缩复溶液按1:1 稀释,用于样本提取后的复溶
配液2:C液:(供奶样用)。
D液:(供奶样用) 硫酸锌
用去离子水溶解定溶至100ml。
配液3: K2HPO4·3H2O
加去离子水溶解定溶至1L
配液4:1M 。
配液5:1M NaOH称取4g NaOH加水定溶至100ml。
样本的处理方法