雌激素对绝经前后女性肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa作用的研究.pdf

目录

雌激素对绝经前后女性肠系膜动脉平滑肌细胞 BK 作用研
1 Ca
究
………………………………………………………… 1
中文摘要………………………………………………………3
英文摘要………………………………………………………8
前言……………………………………………………………15
材料与方法……………………………………………………18
结果……………………………………………………………25
讨论……………………………………………………………45
结论……………………………………………………………55
参考文献………………………………………………………56
英汉缩略词对照表……………………………………………63
2 致谢……………………………………………………………64
雌激素降压的研究进展
3
(综述)………………………………………………………65

2
雌激素对绝经前后女性肠系膜动脉平滑肌细胞
1
BKCa 作用的研究
摘要
目的:原发性高血压病是严重危害人类健康的常见病之一,主要表现
为小动脉和微动脉张力的增加,血管壁不能对抗血管紧张度增高以及
对血管活性物质的反应性出现异常,临床表现为血压的持续增高;人
体肠系膜血管是人体主要的内脏血管,在动脉中占有较大比例,而且
是形成外周阻力的主要动脉,对血管活性物质敏感,对人体血压的调
节具有举足轻重的作用;大电导钙激活钾通道(large-conductance
calcium-activated potassium channels,BKCa)是动脉平滑肌上主要的
负反馈调节器,在血管的舒缩调节中发挥着重要作用。雌激素
(estrogen, E)是女性体内重要的激素之一,具有很多的生物学效应。
流行病学调查显示, 原发性高血压病具有明显的性别差异,绝经前妇
女原发性高血压的发病率明显低于同龄的男性发病率,但在女性绝经
后则不存在这样的差异。研究显示,雌激素在女性心血管功能正常的
维持和调节方面具有重要的意义,其机制有可能与通过雌激素受体
(Estrogen Receptor, ER)调节其动脉平滑肌的结构和功能有关,但具
体机制尚不明确。本实验采用穿孔全细胞膜片钳技术,通过观察绝经
前后女性肠系膜动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,
VSMCs)BKCa 宏观电流及自发性瞬时外向电流(spontaneous transient
outward currents , STOCs) , 并研究 E 对绝经前女性非高血压

1 国家自然科学基金()
3
(pre-menopause women non-hypertension,PNH)组、绝经后女性非
高血压(post-menopause women non-hypertension, NH)组及绝经后女
性原发性高血压(post- menopause women essential hypertension, EH)组
肠系膜动脉平滑肌细胞上 BKCa 及 STOCs 敏感性变化,探讨 E、BKCa
与女性原发性高血压病之间的关系,为 E 对女性心血管系统的保护作
用提供实验依据。方法:在体式显微镜下,游离出肠系膜动脉,并纵
向剖开剪成 2 mm×2 mm×1 mm 的动脉条块,放在酶液中进行两步酶
消化。选取表面光滑、折光性好、立体感强的平滑肌细胞进行实验。
采用穿孔全细胞膜片钳技术记录通道电流。记录到的电流信号经过膜
片钳放大器放大,经过 AD/DA 转换器处理后输入计算机, 采用
Clampfit 、MiniAnalysis 、 软件进行数据分析处理
统计。比较绝经前 PNH 组、绝经后 NH 组和 EH 组应用 E 前后 BKCa
宏观电流及 STOCs 的变化。结果:(1)采用两步急性酶法分离的女
性肠系膜动脉平滑肌细胞 BKCa 宏观电流和 STOCs 的基本特性:
①BKCa 宏观电流具有明显的电压依赖性和外向整流特性;STOCs 的
幅度和频率具有显著的电压依赖性,并随机叠加在 BKCa 宏观电流上。
②200 nM 的 BKCa 特异性阻断剂 Iberiotoxin(IbTX)可明显抑制宏观
外向电流以及阻断 STOCs 。(2)绝经前女性 PNH 组 BKCa 宏观电流
及 STOCs 对雌激素反应性变化:雌激素可显著激活 PNH 组上 BKCa