离体蛙心灌流.doc

;观察钠、钾、钙三种离子对心脏活动的影响。观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。、套管夹、常用手术器械、任氏液、张力换能器、蛙心夹、%NaCl溶液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、300u/:双毁髓→左主动脉结扎→左右两主动脉下方活结备用→剪口,插管(管内盛任氏液与肝素)→结扎备用线(套管+左右主动脉)→剪断动脉→结扎并剪断静脉。固定套管并用任氏液换洗血液;进入RM6240系统。观察并记录正常心搏曲线;向套管内分别加入以下溶液(%NaCl溶液2d、5%NaCl溶液2d、1%KCl溶液1-2d、2%CaCl2溶液1d、1:5000肾上腺素溶液1-2d、1:10000乙酰胆碱溶液1-2d),并作好加药标记,观察并记录曲线变化,待曲线出现明显变化时立即吸去套管中的灌流液,同时做好冲洗标记,并用新鲜任氏液清洗2~3次,%NaCl图35%NaCl图41%KCl图52%CaCl图61:5000肾上腺素图71:。因此,只要将离体失去神经支配的蛙心保持在适宜的环境中,在一定时间被仍能产生节律性兴奋和收缩。另一方面,心脏正常的节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定,所以,改变灌流液的成分,则可以引起心脏活动的改变。从实验结果的几幅图中我们可以看出:%和5%,,,这导致了心肌细胞浆内的Ca离子浓度下降,。图四为给蛙心灌入1%KCl溶液后蛙心搏曲线,,,使心肌细胞膜静息电位绝对值减小,这样静息电位与阈电位水平的电位差减小,,使静息电位绝对值减小至-55mV,这样钠离子通道失活,心肌细胞兴奋性降低,心肌停搏于舒张状态。图五为给蛙心灌入2%CaCl2溶液后蛙心搏曲线,,一方面慢反应细胞4期自动去极速度加快,心肌自律性增强,心率也就增大:另一方面工作细胞动作电位期间钙离子内流量加大导致肌浆钙离子浓度增大甚至持续增大,这样钙离子与肌钙蛋白的结合量增多甚至它们只结合不解离,最后心肌收缩力增强或者心肌持续收缩。图六为给蛙心灌入1:5000肾上腺素溶液后蛙心搏曲线,可以看出心肌收缩力显著增强,