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酵母细胞中谷胱甘肽的微波辅助提取
范崇东王淼
江南大学食品学院,无锡, 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡,
摘要采用微波辅助方法提取了酵母细胞中的谷恍甘肽。研究表明,在功率下对酵母泥
直接微波处理,再以/的物料比提取,或者物料比为/的酵母悬浮液在
下处理,都能有效地提取谷恍甘肽,提取率分别达到./和./。和其他
提取方法比较,微波辅助提取是一种节省能源、快速、简便、有效的方法。
关键词谷恍甘肽,微波辅助提取,产朊假丝酵母,提取
谷胱甘肽一谷氨酰一一半胱氨酰一甘氨可见分光光度计:尤尼柯上
酸是三肽化合物,以还原态和氧化态海仪器有限公司;紫外光栅分光光度计:
种形态存在。作为机体内重要的生上海第三分析仪器厂;一微波炉:中国电
物活性巯基物质,谷胱甘肽对于维持生物体内子器件总公司;一电子分析天平:—
合适的氧化还原环境起着至关重要的作用。⋯..—超声
的制备方法包括化学法、酶法和发酵波细胞粉碎机:宁波新芝科器研究所。
法,其中发酵法是最具潜力的方法·。但是. 实验方法
目前的方法尚存在一些问题。如不稳定, .. 提取方法
无法满足食品、医药等领域所要求的产品纯度微波处理方法:将酵母泥细胞均匀涂布
高,采用溶剂无毒等。于烧杯中,在规定条件下处理,用水提取,离心
微波辅助提取技术—分离定容。方法:将酵母细胞置于烧杯中,溶
,本质上是微波加热原理的应用, 解后在规定条件下处理,冰浴中冷却到室温,离
这种技术提取质量高,能有效保护物料中的功心分离定容。
能成分,产率高,选择性高,提取快可节省热水提取:℃,;沸水提取:沸水溶
%~%的时间,溶剂用量少,耗能低,无污解并保持沸腾;冻熔法:在冰箱中重复冻
染,生产线简单,节省投资,后处理方便【·。结解冻次;乙醇溶液提取: %乙醇水溶液,
℃下提取;超声波:间隔时间,工作时
实验材料和方法
间,全程时间,温度℃,输出功率
. 实验材料。所有提取液均置于℃的冰箱中待测。
产朊假丝酵母—.. 的含量分析
积累株:江南大学生物工程学院,环境采用经典的’测定法,改进如下:
生物技术研究室提供;、%:—在试管中分别加入. 溶液
,华美生物工程公司分装;生化试剂:中/,/,.
国医药集团上海化学试剂公司;牛血清蛋白缓冲液/,.,.
生化试剂:上海伯奥生物科技有限公司。去离子水。
. 主要仪器混合。室温静置,于处测定样品
第一作者:硕士研究生。
江苏省高校高新技术产业发展项目.—
收稿时间:——,改回时间:——
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并记录读数。测定时样品保持在冰浴中。根据
建立的标准曲线计算测定样品中的含量。
.. 蛋白质含量的分析【
采用紫外分光光度法,用牛血清
白蛋白作为标准蛋白。
.. 细胞干重的测定
将离心、洗涤后得到的细胞在℃下烘干· 纯溶液抽提液
至恒重。图微波辅助提取中的稳定性
.. 微波对谷胱甘肽稳定性的影响.. 方法
对纯品和细胞提取液分别在下做平影响微波提取效率的因素有处理细胞的
行实验,考察溶液中浓度的变化。量、作用功率、处理司、提取
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