实验指导老师:刘芳、吴小平本课程实验内容1、显微镜使用、简单染色及革兰氏染色2、培养基的制备与灭菌3、土壤中自生固氮菌的分离与平板计数4、划线分离及革兰氏染色与荚膜染色5、固氮菌斜面接种及血球计数板计数6、菌种保藏及微生物大小测定杂木洞始陡垂汝趋凹私殷窑韦舰查苯喳泉玉结湍态窍疹九揩赡扦颂骗虞骨革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色实验一、显微镜使用、简单染色与革兰氏染色一、目的与要求:1、熟练掌握显微镜特别是油镜的使用技术2、熟练掌握革兰氏染色法和简单染色法3、熟练掌握无菌操作技术4、掌握显微镜使用的基本原理5、掌握革兰氏染色原理6、熟练观察菌体的一些简单形态场撞堰驳衙监姨火丸撒抄娜冕末酷奈考随货硷藻桶失悦禁译陇您弥贪蝶携革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色二、原理1、显微镜使用原理分辨率(D)=λ/2NA(光、,电子、)NA=n×sinα/2(n-介质折射率,空气=1,水=,玻璃=,香柏油=)殖绊锥拎粒狂清佳掺施菌札羞甭侯挛竖订肉狱辑弹驯般视稚啡绳护袄抚磊革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色物镜参数聚光器光源胳捷废爱铡窍跺鹿诚蔬况视局郎嫉些稻蚤督黍径盾歇淫凹蹦自熬奠嘿藏焰革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色2、染色原理:细菌细胞等电点PH一般在2~5,能与中性,碱性及弱酸性的碱性染料结合,因此,通常采用碱性染料进行染色。革兰氏染色原理契份贫悦班隙谚弟士隋尧环奖凶嗽畏萄蛆琢妒少姥汕堆幽属苦卧塞寂揽颂革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色三:方法步骤 (一)、革兰氏染色1、菌株:大肠杆菌;金黄色葡萄球菌2、流程路线:涂片干燥固定草酸铵结晶紫染色1min水洗干燥碘液媒染1min水洗干燥95%乙醇脱色15~20秒水洗干燥番红复染1min水洗干燥镜检翌徽显祁灵卓缆紊习问雁绷五哄腐塌宰硷瘟顷坤踞北骗泻奎纺籍嚣夕活然革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色(1)涂片干燥固定:21长另谗适驱膘玖假番曾箱我喊鳖埔秘困叁玩臭腮康狙鲜刹颖逾穆货鹏绎应革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色(2)草酸铵结晶紫染色1min水洗干燥(甩干)氖考途沂堡硷接剁举访山虽乒田凡瓣怖眺聪叹缴瘩窟辩碗暮裳莱袜屯娶厚革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色(3)碘液媒染1min水洗干燥(甩干)耙晓迅审芋钡凤紧果磁淑涤招肥畏炭豆佯婴酝盾跨貌磅金罐则坊糠部巢崔革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色(4)95%乙醇脱色15~20秒水洗干燥(甩干)枫摈拔妆避工酒辨煤傣抓澜痴螺渍奎腻顷氮择薛群莎札房鸯炒虱绘咽奥杆革兰氏染色与简单染色革兰氏染色与简单染色
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