多头绒泡菌肌动蛋白是一个PSRPK C-末端相关蛋白.pdf

多头绒泡菌肌动蛋白是一个PSRPK C-末端相关蛋白
生命科学学院生物技术专业洪锐沙
学号:2002302096
【摘要】本课题组在前期研究中从多头绒泡菌中分离到一个SR蛋白激酶基因,并将其编码
序列命名为PSRPK。通过激光扫描共聚焦显微镜观察发现,在哺乳动物细胞表达的PSRPK
主要定位在细胞核内,PSRPK的核定位主要与其C-末端的231个氨基酸有关。为了解PSRPK
C-末端结构域的功能,本研究以PSRPK C-末端的231个氨基酸为诱饵蛋白,通过酵母双杂交
筛选了多头绒泡菌酵母双杂AD库,获得了14个可能的PSRPK C-末端结构域相关蛋白的
cDNA片段,这些cDNA片段之一的编码蛋白是多头绒泡菌的肌动蛋白(actin)。在获得actin
开放阅读框后,我们通过酵母双杂交的重复杂交、回复杂交以及pull-down研究确认,actin
可以与完整的PSRPK发生相互作用,说明actin是一个与PSRPK C-末端相关的蛋白。
【关键词】PSRPK;C-末端结构域;酵母双杂交;肌动蛋白
【教师点评】洪锐沙同学在毕业论文实验中做了大量的实验工作,该同学实验严谨、勤奋、
敬业,创新能力和动手能力较强,表现出良好的协作精神和科研素养;科学、完整、系统地
完成了基因工程的工作,熟练掌握了基因和蛋白操作技术。在论文的写作过程中,该生自始
至终保持着认真的态度,该文结构合理,思路清晰,推导正确,研究结果真实可靠,具有一
定的创新性,论文工作量达标。综上所述,该文已达到学士论文水平,建议授予理学学士学
位。
点评教师:张永夏讲师
Actin of Physarum polycephalum is one of the C-terminal
related protein of PSRPK
【Abstract】In former studies, our research group isolated a SR protein kinase cDNA,and named
the coding protein as PSRPK. By the observation of TCS SP2 confocal microscopy (Leica), we
can saw that the PSRPK expressed in living mammal cells are mainly located in nuclear, and the
location in nuclear was related to 231 amino acids on the C-terminal of PSRPK. In order to
investigate the biological function on the C-terminal motif of PSRPK and screen out the related
proteins to the C-terminal motif of PSRPK, 14 possible cDNA fragments related to the 231 amino
acids of PSRPK C-terminal were baited out fr