乌司他丁对内毒素性急性肺损伤大鼠保护作用机制实验.pdf

乌司他丁对内毒素性急性肺损伤大鼠的保护作用及机制的实验研究中文摘要博士研究生:张新颖专业:儿科学导师:王玉林教授研究背景和目的急性肺损伤,是指机体遭受心源性以外的各种肺内外因素现馗腥尽⒋瓷恕⑿菘恕⑺嶂卸炯坝泻ζ逦氲打击后,出现弥漫性肺泡一毛细血管膜损伤所导致肺水肿和微肺不张等病理特征的临床综合征。的临床表现为进行性呼吸窘迫和顽固性低氧血症,晚期常并发急性呼吸窘迫综合征,岸嘣嗥鞴δ苷习酆险,⒉〖保∏樾紫眨劳雎矢居不下,是现代危重医学中的难题。姆⒉』泶碜鄹丛樱裆形赐耆ú鳌D壳叭嗣瞧毡槿衔狝是全身炎症反应综合征锄腿琒在肺部的表现,其本质是一种肺内过度性、失控性炎性反应。而胍话阊字⒌那鹪于它在某些环节上存在抗炎性反应和炎性反应的失衡,损伤与抗损伤的平衡机制遭到破坏,细胞因子在此过程中起到至关重要的作用。因此,细胞因子网络的平衡及其上游的调控研究,成为⒉』频难芯恐氐悖杂诮沂続的发生发展以及以此为靶因素的治疗措施的研究具有重要意义。细胞因子按其在炎性反应中的不同作用可分为促炎性细胞因子和抗炎性细胞因子。促炎性细胞因子中肿瘤坏死因子,一山东大学博士学位论文
胰蛋白酶抑制剂血蹋琾细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,通过磷酸化其他细胞蛋白,从胞浆移位作用。乌司他丁虹是近年来研制成功并广泛应用于临床的一种尿研究方法释放最早、最重要的内源性介质,在炎症过程中具有启动和触发作用。白细胞介素,虮蝗衔J翘迥谧钪匾5目寡仔韵赴蜃樱勺饔糜炎症级联反应的多个环节,在全身性炎性反应过程中起保护作用。丝裂原活化蛋白激酶—,钦婧至细胞核而调节转录因子的活性,启动相关细胞因子和炎性介质的基因表达。其中信号通路与炎症调控反应机制密切相关,被认为是属于“应激诱导’’的,贏肺组织早期炎症反应的内在调节机制中可能具有重要,。近年来有资料显示可抑制炎症介质释放,预防细胞因子级联反应,抑制白细胞过度激活,阻断细胞因子与白细胞之间的恶性循环,在脓毒血症、⒍嗥鞴俟δ芩ソ叩热硇匝字⒓膊≈具有肺保护作用,从而在早期阻断向的发展中扮演了重要角色,但是其详细的作用机制还不十分明确,已有的研究基本停留在源傺仔韵赴子的生成及产生作用的抑制效应上,对于细胞信号转导机制的研究甚少。肺保护作用是否和藕磐揪断喙兀谕馍形尴喙乇ǖ溃浠粕杏待研究。内毒素即脂多糖琇荊一菌细胞壁上的主要致病成分。感染时头湃胙#杉せ罹哂行藕抛5脊δ艿腡芴猯,⒕幌盗械募读P藕糯ǖ荩せ钕赴趐信号转导通路,导致猀、—妊字⒔橹屎透髦逐じ椒肿拥然虻谋泶铩本研究建立盏糀的大鼠模型,静脉注射懈稍ぃ环矫嫱ü观察肺组织病理、湿/干重比值及血清中细胞因子的变化揭示源笫蠓巫橹的保护作用,另一方面采用..际跫觳夥巫橹蠺—的水平,并分别应用免疫组织化学染色和方法观察肺组织中磷酸化的的表达,揭示种拼傺仔韵赴蜃覶—目赡艿姆肿由物学机制,为牧俅灿τ锰峁┮欢ǖ睦砺奂笆笛橐谰荨山东大学博士学位论文
模型组大鼠给予出簿猜鲎⑸洌稍ぷ榇笫笤谖簿猜鲎⑸銵锒莋锬P偷慕⒓胺肿椋貉∮媒】敌坌钥周龄笫清洁前垦8鑅单位/簿猜鲎⑸洹6哉兆榇笫蟾栉簿猜鲎⑸涞攘及甧陆的生理盐水。整个实验期间所有大鼠均喂标准饲料,实验前禁食杂觳椤甊研究结果级婊殖桑憾哉兆椤⒛P妥楹臀谒舅「稍ぷ椋哉兆榘磍、治个亚组,模型组和干预组按、、分为鲅亲椋椋孔只。饮水。瓯静杉焊髯槎镌谙嘤Φ牟煌钡惴直鸶%戊巴比妥钠腹腔麻醉打开并暴露胸腔,肉眼观察肺组织大体病理改变。经左心室穿刺抽血,离心后留取血清置于一℃冰箱保存。取血结束后立即留取肺部标本,取左肺计算肺组织湿/干重比值/;取右肺上叶以%中性甲醛固定以备染色和免疫组化染色。取右肺中、下叶放入液氮中冻存,.℃保存,以备9鍴旧ú⒓扑惴巫橹±硭鹕似婪帧瓻法检测血清中虸呐ǘ取ḿ觳夥巫橹蠺的相对表达量。庖咦榛ḿ觳饬姿峄膒蛋自在肺组织中的表达。法检测肺组织中磷酸化的的表达。<屏孔柿嫌胢±表示,各组之间的差异采用单因素方差分析,。话闱榭觯憾哉兆榇笫蠛粑轿龋疃廾飨员浠ú看婊睿ト∈迅速逃避,解剖后肺外观色泽粉红,无明显异常改变:模型组大鼠各时点均出现竖毛、呼吸急促危,口唇发绀,精神萎靡,少动少食,抓取时无力逃避,组和组各有淮笫笏劳觯羲狼俺鱿殖榇ぃ笮”闶Ы畲蠛粑四肢僵硬,解剖后肉眼见肺组织体积增大,脏层胸膜张力较高,表面色泽暗红,可见包膜下点状、片状出血,切面疏松,有黄色或淡红色液体溢出,尤以组最为明显;干预组各时点表现相对较轻,所有动物均存活,抓取时能够逃避,解剖畐山东大学博士学位论文
壁无增厚,肺泡间质无炎性细胞浸润,肺泡隔均匀一致。模型组肺组织的结构破血、少量炎性细胞浸润。后肺有类似上述改变,但范围小,程度轻,体积增大不明显,表面呈红色,可见少量出血点。巫橹#芍乇戎疍谋浠耗P妥榇笫蠓巫橹腤/明显高于对照组.