9月11-13号细菌数目的测定3栋微生物实验室王瑶琼、黄大川9月14-17号酵母菌含量的测定3栋微生物实验室王琼瑶、黄大川9月18-24号霉菌数目的测定3栋微生物实验室王琼瑶、黄大川9月25-28号大肠菌群的检测3栋微生物实验室王琼瑶、黄大川地点邵阳学院3栋实验室单位邵阳学院主要实录员二、::2014年9月11-、500ml烧杯2个、250ml三角瓶2个、研钵一个、试管4根、玻璃棒2根、培养皿12个、涂布棒1根、剪刀1把、洗耳球、牛角匙、试管架、电磁炉、天平均一个、pH试纸、标签纸、纱布、棉花、棉线若干、高压蒸汽灭菌锅一台,恒温培养仪一台,超净工作台。--:准确称取各种成分。一些不易称量的成分如牛肉膏,可用玻璃棒取出放硫酸纸上称量,然后连同硫酸纸一起放入烧杯中。计算:根据配方计算出实验中各种药品所需要的量,然后再分别称量。:向烧杯内加入所需的水量,将牛肉膏用水洗下后,取出硫酸纸弃去。加热搅拌全溶后稍放冷。调pH值:用酸度计或精密pH试纸测定其pH值,并用10%NaOH调至所需pH值,必要时用滤纸或脱脂棉过滤。,因为高压蒸汽灭菌后,pH常降低。灭菌:培养基用121℃高压蒸汽灭菌15-20min。分装:根据不同需要,可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内。注意分装时避免培养基挂在瓶口或管口上引起杂菌污染。如液体培养基,应装试管高度的1/4左右;固体培养基装试管高度的1/5左右;装入三角瓶的量以三角瓶容量的一半为限。包扎:试管扎成捆。试管和三角瓶的棉塞外用硫酸纸和牛皮纸包扎,纸上表明培养基的名称、配制日期等。①预处理:以无菌操作取25g样品(盐津铺子豆干)移至研钵中大力磨碎加入225ml无菌水混合均匀即制成1:10的样品均匀稀释液。②十倍稀释:用1mL无菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,沿管壁徐徐注人盛有9mL无菌水的无菌试管中(注意吸管尖端不要触及管内稀释液,下同),振摇试管混合均匀制成1:100的样品匀液。按上述操作,依次制成10倍递增系列样品匀液。每递增稀释1次,换用1支1mL无菌吸管。从制备样品匀液至样品接种完毕,全过程不得超过15min。:培养基宜占培养皿的1/3。,选择2个适宜稀释度(根据对盐津铺子豆干的污染情况估计可选取10-2、10-3、10-4三个稀释度),分别在作10倍递增稀释的同时,吸取1mL样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度作2个培养皿。同时,分别吸取1mL空白稀释液加入2个无菌培养皿内作空白对照。稀释液移入培养皿后,应及时用涂布棒在培养基表面将样液均匀涂布。*注:每个稀释度做两个平皿的好处在于有利于排除错误的培养皿,单数量的培养皿也有利于选取中间菌落数,防止一大一小不好取舍,使得数据更加准确。—20min,目的是使样品液侵入培养基。:36±1℃下培养24±1h。:选取菌落数在30CFU~100CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。每个稀释度的菌落数应采用三个平板的平均数。*注:若所有稀释度平均菌落数均大于100,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。若所有稀释度平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。:每克样品中菌落数=(C/V)×M其中,C—某一稀释浓度下平均菌落数,V—涂布平板时所用稀释液的体积(ml),M—稀释倍数。记录实验中盐津铺子豆干中细菌的含量数据:稀释度10-210-310-4空白平板132×1023×1031×1040平板224×1024×10300平板326×1024×1031×1040平均菌数(个/g)×××1040注:::2014年9月14-、500ml烧杯2个、250ml三角瓶2个、研钵一个、试管4根、玻璃棒2根、培养皿12个、涂布棒1根、剪刀1把、洗耳球、牛角匙、试管架、电磁炉、天平均一个、pH试纸、标签纸、纱布、棉花、棉线若干、高压蒸汽灭菌锅一台,恒温培养仪一台,超净工作台。-
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