电镜标本取材方法及要求.doc

• 组织和器官取材方法事先准备好所需的器械和固定液,并把它放4℃冰箱内预冷备用。如为穿刺物(肾组织、肝组织、脾组织等)、剪取物(胃镜剪取物、支气管镜剪取物、肠镜剪取物等)、手术切除物(肿瘤组织以及实验动物脏器等),%戊二醛固定液(保质期为1个月)内,并把它放4℃冰箱内保存,一般要求在两分钟内完成。在处理手术切除物时,应事先准备好两把锋利的刀片(如剃须刀或手术刀)和蜡板,把固定液滴在蜡板上,再把切下来的脏器用手术刀切成小块,放在蜡板上的固定液中,接着用双刀片拉锯法(具体做法请向我室工作人员咨询)在固定液中将组织切成约1立方毫米大小或横切面约1平方毫米的长条形,然后用牙签或镊子(轻轻夹住,禁止挤压)把组织移入装有固定液的小瓶内,用医用胶布封好并做好标记。如为肺组织,应在固定液中充分震荡,使其完全沉到瓶底为止。• 游离细胞取材法组织培养和游离细胞(如血细胞、脱落细胞以及细菌病毒等),常悬浮分散在介质中,首先必须将其凝集成团,然后进行固定,具体做法如下:1、血浆凝集法:将抗凝全血离心分层(2000转/每分钟,10~20分钟),用毛细吸管沿着管壁轻轻的将上清夜吸取(不要破坏白细胞层),接着用吸管吸取固定液,%戊二醛固定液慢慢地加入进行固定,然后把它放在4℃冰箱内保存。2、血浆(血清)混合法:如为细菌、病毒、脱落细胞、培养细胞则先将它们制成悬液放置于离心管内(最好是玻璃的),离心成团(3000转/分钟,10分钟),%戊二醛固定10分钟左右,再弃去多余的固定液,然后和少量抗凝血浆或血清混合均匀,离心成团,去上清夜,%戊二醛固定液沿着离心管壁缓慢滴入,尽量避免团块分散,静置于4℃冰箱内固定备用。3、琼脂预包埋法:有些游离细胞离心后容易散开,可用此法处理。首先将细胞、细菌、病毒等用生理盐水制成悬液,然后离心成团(2000转/每分钟,10—20分钟),去上清夜,%戊二醛固定液预固定1小时以上,再离心,去上清夜,加磷酸缓冲液或生理盐水漂洗,再离心,如此循环操作2次备用。其次配制好2%琼脂水溶液,加热完全溶解后,保持在50C~55C之间;再将上述离心物在水浴中加热至50℃。第三,用热吸管吸取热琼脂加入到细胞团中,搅拌均匀,立即离心5分钟(4000转/每分钟,)。