【精品】农大论文.doc

【精品】农大论文.doc:..吉林农业大学学士学位论文题目名称:农杆菌介导法转Hrpz基因玉米的初步检测学生姓名: 郝媛媛 院系:生命科学学院专业年级:07级生物工程指导教师: 关淑搆职称:副教授2011年05月19H题目 I摘要及关键词 I1前言 12材料与方法 53结果与分析 64讨论 7参考文献 7致谢 8农杆菌介导法转Hrpz基因玉米的初步检测学生:郝媛媛专业:生物工程指导教师:关淑艳摘要:本实验以农杆菌介导法转Hrpz基因的玉米自交系丹988的叶片作为材料,分别运用高盐低PH值法和SDS法对玉米基因组的提取及纯化进行研究,试图筛选出最佳的DNA提取方法。同时通过设置不同的退火温度,运用PCR技术对转化植株进行初步鉴定,然后经琼脂糖凝胶电泳法检测。结果表明:SDS法较高盐低PH值法纯化效果好,并且退火温度为48°C时,扩增效果最好,并检测出阳性植三株。本实验优化了PCR反应的条件,初步证明了外源目的基因已整合到玉米基因组中,为进一步鉴定做了良好的基础。关键词:农杆菌介导法;Hrpz基因;琼脂糖凝胶电泳;SDS;高盐低PH值法;PCRAgrobacterium-ransferHrpztheinitialdetectionofcornName:HaoYuanyuanMajor:BiologicalengineeringTutor:GuanShuyanAbstract:theexperimentwithagrobacterium-mediatedtechniqueturnedHrpzgeneinbredlines1Dan988leavesasmaterials,highsalt,usingrespectivelylowPHvaluemethodandtheSDSmethodtotheextractionandpurificationofcorngenomewerestudied,,bysettingdifferentannealingtemperature,usingPCRtechnologyforconversionplants,thenthepreliminaryidentificationagarosegelelectrophoresismethodtodetect・TheresultsshowthathighsaltSDSmethodlowerPHmethodhasgoodeffect,andannealingpurificationfor48°Ctemperature,amplificationeffectisbest,(PCR),initiallyprovedexogenouspurposegenehasintegratedintothecorngenome,:agrobacterium-mediatedtechnique;Hrpzgenes;Agarosegelelectrophoresis;SDS;HighsaltlowPHvaluemethod;PCR1前言:、微生物及动物中分离到的目的基因,通过各种方法转移到作物基因组中,使之稳定遗传并赋予作物新的遗传性状,如抗虫、抗病、抗逆、高产、优质等。近几年,转基因玉米发展十分迅速,现已成为全球种植面积第二的转基因作物l,Jo关于转基因玉米的研究与开发在我国也受到了各方面的高度重视,并取得了显著的进展。一些基因导入玉米植株后,会使植株具有抗病虫、抗旱等优良特性,可以大大促进植物生长发育、提高产量。Hipz基因就是这种基因。那么,一种或几种基因是否导入到植物中是需要有关技术来检测的。转基因作物的检测技术有基于DNA的检测方法(如PCR检测