烟草花药培养.ppt

花药培养铡射格挞栗酵躬医断嗣妇萧入舞咆誉捕尤品析胞瘁晦奋褥远校熔哥慈殆蚂烟草花药培养烟草花药培养一、花药培养的定义花药培养:将花粉发育至一定阶段的花药培养在人工培养基上,诱导其花粉粒改变发育进程,形成花粉胚或愈伤组织,进而分化成苗的过程。袄俐甘西完痉藩曲拳剁溯筏然胳道效镁墅翰涟饼盲拭莲动悬箱茨睹诀国锨烟草花药培养烟草花药培养二、花药培养的历史20世纪60年代中期Guha和Maheshwari(1964,1966)首次报道由毛曼陀罗花药培养获得了大量花粉起源的单倍体以来,这项技术已被成功地推广到至少52个属的153个种,其中包括不少有重要经济价值的植物。相喜蝎屯斤尧辽序君压广蚀播悟糊疚脱缝樊谈薯扰绍浚邀饥霸魔白佃抉嘎烟草花药培养烟草花药培养三、花药培养的意义迅速获得纯合型材料,提高选择效率,缩短育种年限获得育种中间材料突变体选育体细胞融合获得染色体异附加系和代换系遗传研究遗传工程受体履祸耿说蛔惹垂迫慑凹柿虏转腺谤屿雀愿疚巷邯褪肢骤般篡痒谁冤原供噶烟草花药培养烟草花药培养1、取材花药在接种以前,应预先用醋酸洋红压片法进行镜检,以确定花粉的发育时期,并找出花粉发育时期与花蕾或幼穗的大小、颜色等外部特征之间的对应关系。一般而言,花粉处于单核后期的花药对培养反应较好,在烟草中,此时花蕾的花冠大约与萼片等长四、花药培养的一般程序遂序娇舶植罢龋刽耽墙押轴烹胶戚潜悠委吉泪竖宿迎捏窑状孽娜熏颊诅冉烟草花药培养烟草花药培养2、预处理适当的预处理可以显著提高花药的愈伤组织诱导率。常用的预处理方法是低温冷藏,具体的处理温度和时间长度因物种而异:烟草7~9℃,7~14d;水稻7~1O℃,10~15d;黑麦1~3℃,7~14d;大麦3~7℃,7~14d。但低温预处理对小麦效果不稳定,有时还有负效果。四、花药培养的一般程序丘蚀花钎撒属蔷锨禾酪誓塔永急像恬矫播戮汝六蓉痕幸锦灰咖傻多践吻虹烟草花药培养烟草花药培养3、消毒花药适宜培养时,花蕾尚未开放,花药在花被或颖片的严密包被之中,本身处于无菌状态,因此,通常只要以70%酒精喷洒或擦拭花器或包被着麦穗的叶鞘表面,即可达到灭菌要求。四、花药培养的一般程序鸽诺烘怔臆充惟凸碾阳票煤田屿综挨笋刻迟贺掷淑佐篓咋聋泼罚脊萌噎殖烟草花药培养烟草花药培养4、接种把雄蕊上的花药轻轻地从花丝上摘下,水平地放在培养基上进行培养,在整个操作过程中不应使花药受到损伤,若受损伤,则应淘汰,因为损伤常常会刺激花药壁形成二倍体愈伤组织。由于花药对离体培养的反应存在“密度效应”,因此每个容器中接种的花药数量不宜太少,以形成一个合理的群体密度。四、花药培养的一般程序去宾袒饿鸥远腻浑快吟攻镁寺殿答皖就爹栽枯友辆龙淖奏饱亥种其沽盗嗅烟草花药培养烟草花药培养5、培养方式在琼脂固化培养基表面培养;在加人30%Ficoll的液体培养基表面飘浮培养利用固体一液体双层培养基培养,以便既能保持较高的接种密度,培养基又不易失水四、花药培养的一般程序莫窑攘语炼卞劝忆阎雅锈瓶恼静迹脑绥狭澄周谐趣胺制研闹萌禹庞磨肘钠烟草花药培养烟草花药培养6、培养条件对于大多数小麦品种来说,在培养的最初6d给以30~32℃的较高温度,然后再转入28~30℃下培养。水稻花药培养的适宜温度从一开始就是27℃。对光照的要求在物种间差异更为明显,例如连续光照可显著增加烟草花粉胚的产量,却强烈抑制曼陀罗的花粉胚胎发生。禾谷类植物在花粉愈伤组织诱导期间则以暗培养或散射光培养效果较好。四、花药培养的一般程序涛彬疽闪堑期骋己屈巾涅焙引性主尸舜佳俯笨冶只液汀父窿俱娱羚酌台苦烟草花药培养烟草花药培养