正相高效液相色谱法测定追风舒经活血片中士的宁的含量.doc

正相高效液相色谱法测定追风舒经活血片中士的宁的含量冯云张越华杨国振陕西省西安市药品检验所(710054 摘要:采用SiLica色谱柱,正已烷—二氯甲烷—甲醇—浓氨试液(:::;254nm为检测波长,正相液相色谱法测定了追风舒经活血片中士的宁的含量。-,与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=,%,%(n=5。本法专属性强、重现性良好。追风舒经活血片是由15味药材组成的复方制剂,具有舒经活血、散风祛寒等功效,用于风寒串入经络引起的腰腿疼痛,四肢麻木。制马钱子为方中君药,且又有毒性,因此,必须控制其含量,以保证服用既安全、又有效。马钱子约含1-%的生物碱,其中主要有士的宁(strychnine马钱子碱等。为此,以士的宁为对照品,建立了正相高效液相色谱法测定方中士的宁的含量,以控制制剂内在质量,方法具有灵敏、准确、重现性好等优点。1 仪器与试药 LC-10ATvp高效液相色谱仪(日本岛津;甲醇为优级纯,其它均为分析纯试剂;士的宁对照品(含量测定用,中国药品生物制品检定所,批号0705-9304,追风舒经活血片(长春新宁制药公司。2 方法与结果 (250×,5u,流动相正已烷—二氯甲烷—甲醇—浓氨试液(:::;;柱温:35℃;检测波长254nm;。 线性关系考察[]对照品溶液的制备:,,摇匀即得。标准曲线绘制:、、、、,注入液相色谱仪,测定。以对照品进样量(Λg为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,得回归议程为A=+51716,r=,-,与峰面积积分值呈良好的线性关系。 供试品溶液的制备[3],取本品15片,除去包衣,精密称定,研细,,置具塞锥形瓶中,精密加氯仿25ml与浓氨试液1ml,称定重量,放置过夜,超声处理20分钟(250W,50KHZ,放至室温,称定重量,补足减失的溶剂量,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密吸取续滤液15ml,置分液漏斗中,用硫酸溶液(3→100萃取5次,每次15ml,合并萃取液,用浓氨试液调节PH值至9~10,再用氯仿提取5次,每次25ml,合并氯仿液,蒸干,残渣加醋酸乙酯溶解,转移至10ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得,作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5Λl,注入液相色谱仪,见附图。 空白试验,取缺制马钱子的阴性对照样品与供试品溶液同法制成阴性对照溶液。照高效液相色谱法试验,在相同的色谱条件下进样。结果,色谱图中在与士的宁对照品相应的保留时间处无色谱峰,表明阴性对照无干扰。 精密度试验精密吸取同一供试品溶液5Λl,注入液相色谱仪,连续测定5次,结果表