Candida utilis高密度培养及其提高其胞内谷胱甘肽含量研究.pdf

中文摘要审文摘要谷胱甘肽(GsH)是~,作为一种能够保护细胞抵御外界环境条件的刺激和胁迫的重要活性三肽,在生物体内有着多种重要的生疆功能,特别是对于维持生物体内适宜的氧化还原环境起着至头重要的作用。被广泛应用于临庶医药、食鼎工业、体弯运动等多种生物研究领域。微生物发酵法是目前GsH工业化生产的最普遍方法之一,谷胱甘肽是一种胞内产物,本论文以一袜高积累GsH的产麟假丝酵母(c.Ⅳ,f胁wsH02一08)为出发菌株,以细胞茅【iGSH的离产量、高产率为髫标,采用一系列可幸亍性方案寒提高缨胞密度葶瑟GSH的胞内含量,研究的主要内容如下:(1)谷胱甘肽是一种胞内产物,提离细胞密度将有助予提高GSH浆产量。考察了恒速流加和指数流加等不同培养方式对cI“。经过48h的指数流加培养方式时,细胞干重(Dcw)达到69g·L~,GsH产量和胞内Gs}{含量均达到最大僵835mg—L。%,怒提嵩维胞密度是较为理想的选择:(2)、甘氨酸和L+半胱氨酸等三种组成GsH的莉体氨基酸对合成Gs}{豹影鞠。,当添加浓度为8mmol·01时,GSH产量和胞内GSH含量分别比对照提高了51%和82%;(3)在摇瓶条件下,三种氨基酸混合添加对提高GsH的产量和腮内含量影响最大,添加浓度均为8mmol·L‘1时,-%,对照提高了91%和121%;(4)在7L罐上,考察葡萄糖流加培养与添加b半胱氨酸结合对细胞合成GsH的影响。当一次性添加L一半胱氨酸浓度为40mm01·L_1时,%,GSH产量达到1458mg·L一,实现了高细胞密度培养与高GsH胞内含量的统一:(5)在7L罐上,当一次性添加混合氨基酸浓度均为40mm01·L_l时,胞内GsH含量摄裹达到2。43%,GsH产量达至《1568mgt∥,Gs}{·L_1·h-1,使得GSH的总量和生产强度均得到了较大提高,最终显著地提高了是标产物GSH的产量;(6)根据微生物的生理特性,研究了过氧化氢胁迫对缨胞合成GsH的影响。研究江南大学硕士学位论立C台n幽如埘甜打高密度培养及提高其胞内替胱甘肽含薰的研究发现合适浓度的H202刺激对细胞合成GSH是有利的。在7L罐上,当H202的流加总浓度为36mmol·L_1时,GSH最终产量为922mg·L。1,%,比对照高出35%。关键词:镰胱甘获,产腻瑕丝酵母,高密度,流加发酵,,混合氨基酸,过氧化氢,胁迫蒸苎垫墨ABSTRAC,rAsoneoftbem勾ornon-pounds,glutathione(GSH),lls,,fo醚indu{;try,alhleticsponsa11dbioiogicalresearch,},{,sHprodu。。ldofcellandGSH。tsinvolvedinthis她siSaredescribedasfollows:(1)确eincreaseofdrycellweight(DCW),-,exponentialfeedingmteculture、抛sm