情境四:药物定量分析任务一:定量分析样品的前处理方法知识点:生物样品分析的前处理方法课程:(1)蛋白变性如应用三氯醋酸、HClO4、有机溶剂(乙醇、丙酮、乙腈)使蛋白沉淀(2)盐酸水解(3)酶消化法最常使用蛋白水解酶中枯草菌溶素(一种细菌性蛋白分解酶,可在pH=~)生物样品分析的前处理方法生物样品分析的前处理方法定量分析方法的验证——生物样品分析(1)特异性内源性物质不得干扰原药、代谢物(2)标准曲线 r≥,至少5个浓度,不许外延(3)精密度和准确度 RSD≤15%、20% 相对回收率85~115%(80~120%)生物样品分析的前处理方法(4)最低定量限LOQ 3~5倍t1/2,或1/10~1/20倍Cmax(5)样品稳定性室温、冻融、冰冻长期(6)提取回收率(绝对回收率) 一般低于100%,须稳定(7)质控样品已知浓度样品均匀放入待测生物样品序列中,以确保定量测定的准确度生物样品分析的前处理方法样品固相净化及反相高效液相色谱法 测定血浆中茶碱伍朝筼等药学学报,1989,24(10):769~773案例生物样品分析的前处理方法血浆样品净化后空白血浆净化前空白血浆ColumnZorbaxC185µ-ODS9-11µm5:甲醇-醋酸钠()50׃5012840min茶碱咖啡因12840min12840min生物样品分析的前处理方法50100150200252015105茶碱(µg/ml)(min)·······················(µg/ml)·····标准曲线Y=10-2X+10-3r=!
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