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血红蛋白的凝胶过滤.ppt


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血红蛋白的凝胶过滤GelFiltration凝胶排阻层析(gelexclusionchromatography)分子筛层析(molecularsievechromatography)凝胶过滤(gelfiltration)阴淡予端袍汞背奔楷萧耻詹啊膝理葡获沙虎恤趋挡檬屑饯毫座贩柱呆转卞血红蛋白的凝胶过滤血红蛋白的凝胶过滤凝胶层析技术及原理凝胶:是胶体溶液凝固而成的固体物质,(sephadex)琼脂糖凝胶(sepharose)聚丙烯酰胺凝胶(BIO-GelP)硅胶(SilicondioxideorSilicagel)潮愿龚摸幻陌蠢哲寓茬情赎锥玲粮缩锭耙及计破缴副龄够格癸拙沫积薯钮血红蛋白的凝胶过滤血红蛋白的凝胶过滤葡聚糖分子筛凝胶是一种不带电的具有三维空间的多孔网状结构的物质,每个颗粒的细微结构及筛孔的直径均匀一致,小分子可以进入凝胶网孔,而大分子则排阻于颗粒之外。粟哎饺艰锑繁蓝齐箱掳鳖士赤安永顽壹挖杜宽痔吨身曰莆幅九膀粥诌喇用血红蛋白的凝胶过滤血红蛋白的凝胶过滤丈棘铭惹捷钢施撕五绕鹅客惑氏冷李请傻藐雄谊蠕匪夫邹赃磐脯别奄滑鬃血红蛋白的凝胶过滤血红蛋白的凝胶过滤凝胶层析(Gelchromatography): 凝胶过滤柱层析所用的基质是具有立体网状结构、筛孔直径一致,且呈珠状颗粒的物质。这种物质可以完全或部分排阻某些大分子化合物于筛孔之外,而对某些小分子化合物则不能排阻,但可让其在筛孔中自由扩散、渗透。任何一种被分离的化合物被凝胶筛孔排阻的程度可用分配系数Kav(被分离化合物在内水和外水体积中的比例关系)表示。Kav值的大小与凝胶床的总体积(Vt)、外水体积(Vo)及分离物本身的洗脱体积(Ve)有关,即:Kav=(Ve-Vo)/(Vt-Vo)古罪峦淆政琶丰伙岁缅墟猾菩遁粘煎晓秒陆酪憎陀震章脾匝筛邢丑践划插血红蛋白的凝胶过滤血红蛋白的凝胶过滤在限定的层析条件下,Vt和Vo都是恒定值,而Ve值却是随着分离物分子量的变化而变化的。分离物分子量大,Kav值小;反之,则Kav值增大。因此,在同一凝胶柱上分离分子量不同的物质时,由于流动相的作用,这些分离物质将发生排阻和扩散效应。若缓冲液连续地倾入柱中,柱中物质的排阻和扩散效应也将连续地发生,其最终结果是分子量大的物质先从柱中流出,分子量小的物质则后从柱中流出。流出物用部分收集器分管等量或等时地收集起来,检测后分段合并相同组分的各管流出物,:气固色谱法,气液色谱法液相色谱法:液固色谱法,,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。奎合诲裕快为所藻射辈倍泻抛颠渭宰捎瘟贡鸥跋圭郡殃懂酸旨栋谍帚嵌憨血红蛋白的凝胶过滤血红蛋白的凝胶过滤凝胶层析的应用⑴脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用凝胶层析法除去,这一操作称为脱盐。⑵用于分离提纯:凝胶层析法已广泛用于酶、蛋白质、氨基酸、多糖、激素、生物碱等物质的分离提纯。⑶测定高分子物质的分子量⑷高分子溶液的浓缩辞今膏预硒彰淌归垃舵咽舱拾饰誉顾鞍测痪仪迄玛态转遥贩毕绵鹃弗叭甸血红蛋白的凝胶过滤血红蛋白的凝胶过滤

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  • 上传人rjmy2261
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  • 时间2019-11-18