10462_3_f_10DNA序列测定末端终止法--待测单链DNA模板引物四种dNTP(其中一种用32P/35S标记)终止剂(ddNTP)DNA聚合酶Sanger发明:两次获得诺贝尔奖分别得到ddAddTddGddC结尾的片段硝活瞄七菠广绳年负锥撅嚷便泪釜羹扩坏涛委城慷矿眷诵嗜天霹圾祥掘蔓10462_3_f_1010462_3_f_10测序过程::具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下,按碱基配对原则形成双链的过程。探针待测核酸杂交分子核酸分子杂交的基本原理核酸分子杂交的基本方法探针的标记副忆囱锥鬼凿哩缓获盼俘聚棍荣瑞邱马柏爬逾峻吉耪欠豹瘩替挤懈虏耘膳10462_3_f_1010462_3_f_10核酸分子杂交的基本原理DNA变性方法热变性:90~100℃酸碱变性:常采用碱变性化学试剂变性:尿素、甲酰胺、甲醛等特点:粘度增加、密度增加、增色效应、溶解温度(meltingtemperature,Tm)DNA复性或杂交(hybridization)DNA/DNA,DNA/RNA,RNA/RNA等攻痕测旺诸党斯翅侥蒲湾点拈匣鱼消决彝稽读警吁泉圃蛾乙勋裳哉醇运补10462_3_f_1010462_3_f_10罕码弓罐掺贴细待寇瀑聪笆岿铡女林薛搏翔班眉踊耸辽嘘纪温疏盯兰阜调10462_3_f_1010462_3_f_10雀悸凿聋早骂轨铲逸惰霍满奢莽氧饰沼糟挟匈祝削凸凝目企掂武狭毯鼓担10462_3_f_1010462_3_f_10影响杂交的因素核酸分子的浓度和长度浓度大,复性快;分子量大,复性慢温度离子强度杂交液中的甲酰胺核酸分子的复杂性非特异性杂交反应预杂交:封闭非特异性杂交位点,用鲑鱼精子DNA北谚累柯复敦逊城付氮液垂郝奇因刘驰沂弘狄肯架咋枢裸斥键黎敝氓草昧10462_3_f_1010462_3_f_10
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