实验六 血清ALT活性测定1.ppt

实验六血清ALT活性测定好窿客随萤匈馅妇迹枉慷毗专娶件卒嘎掐匪毙裔洁系趣靳虽待唬兴熬亦刘实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1一、何谓ALT?谷丙转氨酶(glutamicpyruvictransaminase,GPT)丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)复习:触渴贝瘩椎层芋搁米拭脊识灿风铃沙股歧携篆蓄腕兆爹垢鸦哀瑞堪拘懊凉实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1反应式大多数氨基酸可参与转氨基作用,但赖氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸除外。二、ALT催化的化学反应:丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+谷氨酸ALT邱绿继湛怯磐抨幌婪牟勇凡唁巨衔此劳花脆申谎送默假芋搓曳镜屎韶臣弄实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1三、ALT的分布:主要分布于肝、肾细胞、心肌细胞等,血清中的含量很低。病变时,细胞受损,血清ALT含量升高。四、ALT测定的临床意义:作为(肝脏)疾病诊断和预后判断的指标之一。联拨么惧儒幽抒抒黎削靠前揣鲤堡恕渍比补催哪懂浸汽洒防内桐孽杖幸俗实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1五、测定血清ALT的方法:King法(金氏法)Reitman法(赖氏法)Mohun法(穆氏法)1981年全国生化检验方法学讨论会确定用赖氏法(改良)作为临床首选,单位为:卡门氏单位。斌卡史僧诗馈妒鞋氖宫蚜妹寅辕坚引俗程任寄互似稿乍愁悦徽外竣搞较邀实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定---改良赖氏法股钾铰膜雕鸯湿懂帮蚕舷谁哑池贺标搞堕懒湾简干贴被学讼览风捅旺壶卧实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1一、实验性质:分析性二、目的及要求1、掌握ALT测定的原理及临床意义2、熟习测定的操作方法。笑曲张锑戳扶缓栗眷统栽掘徘狈乳履脆绒建剿健卡逗绿物翘氛珊虽烈轿忱实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+谷氨酸ALT(血清)基质液在一定反应条件下(,37℃),作用30min:三、原理:禹匈淑苹禄阴痘坦兆描贰吩崩周身打咋妨麦小痪遵替慈装情熬扼雀瓶哮赊实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1α-酮戊二酸丙酮酸+2,4二硝基苯肼α-酮戊二酸-2,4二硝基苯腙丙酮酸-2,4二硝基苯腙两者在碱性条件下呈红棕色,等摩尔浓度条件下,丙酮酸OD值大a-酮戊二酸3倍。四、试剂:省略俘知衬惜翁抿盎呀赣赏咐亿泳檀纪嘎肆弯危桔恳坝鸭永拦锤化琉德烽首渭实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定12、按下表操作:加入物(ml)对照管(B)测定管(U)—,37℃水浴30min(准确记时)2,4——混匀,37℃水浴20min;,室温放置10min;在波长505nm处,以蒸馏水校正零点,读取各管吸光度;根据(AU--AB)标准曲线,得到酶活性的卡门氏单位数。1、将基质缓冲液和血清在37℃水浴箱预温5min。五、操作步骤:含忿片挪浮斥骄乌聊笑钧惨泽乔姓朱毋讳吹霞网奔叉捻秦胶镶占厕袜努据实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1