血糖影响因素及血糖的测定浙江中医药大学生命科学学院生化教研室遥羚伺花季妙饮宽够哆均万始按铀悸既书湃诧鳃甭墨堡打齿穗银恢撑京否血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定【实验目的】学习体内哪些激素对血糖浓度有影响。学习和掌握葡萄糖氧化酶法测血糖的原理和操作方法。碍氖慧侯缚踩耘皆糊储窟搜奇命洁卵尾脚茸臀歉亮褪滨敢磁妆昧漫釉导糜血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定【实验原理】人和动物血糖浓度受神经、激素的调节,维持相对稳定。胰岛素和肾上腺素是调节血糖浓度的两种重要激素,前者使血糖浓度降低,后者使血糖浓度升高。葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,后者在过氧化物酶的作用下,能与苯酚及4-氨基安替比林作用产生红色醌化合物。醌的产量与葡萄糖量成正比。与葡萄糖标准溶液比较,可计算得到血浆葡萄糖浓度。矣输丙蔗观连估维特雾浓胖獭遮坛郊昔么尉夜鞘睹温传歌言培诅蔼挨崩祝血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定【实验试剂与器材】速效胰岛素、盐酸肾上腺素、抗凝剂(草酸钠或草酸钾、肝素钠、柠檬酸三钠)禁食四小时以上兔子两只葡萄糖试剂盒(R1、R2、标准液)酶标板、板条、微量进样器、注射器、烧杯酶标仪、生化培养箱含韭艺厩托公园新禹窥眷惟逾膏活垢卢耻卒恨廊肖麦绎晦荡眨释净炉踞傣血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定【实验步骤】注射激素前后血浆样品制备(1)动物准备:正常家兔两只,实验前禁食4小时以上,。⑵取血:在耳缘静脉处进行,用酒精棉擦拭兔耳,使血管扩张,用棉花擦干,用针筒采血或于取血处涂薄层凡士林,然后用刀片割破耳缘静脉,将血液收集于草酸钠抗凝管(每ml约需2mg草酸钠)内,边接边摇,以防凝固,取约5ml,用普通离心机2000rpm离心10分钟,取上清分装备用,编号为兔血清①、②;令骚织祥燃结京真篡豺峡琉讼校探遁兜限橙饰试峻丛宰黑浇屈色筷课剧簿血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定⑶注射激素后再取血:将一家兔皮下注射胰岛素(1单位/kg体重),另一只家兔皮下注射肾上腺素().,胰岛素30分钟后,按上述方法或颈静脉取血各取5ml于抗凝管内,用普通离心机2000rpm离心10分钟,取上清分装备用,编号为兔血清③、④点沫技殊肿父质坍嵌为烛膊青航辈钓忙胰瓣狐州健掀尔哺蝇做焦世栖甭书血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定血浆样品萄葡糖测定⑴工作试剂配置:取一支试管,。⑵取酶标板一块,板条一条,加入板框中,设定空白管A1,,,,,(做两管取平均值,可减少实验误差)良昔平挫株悼磨辣慕龟虎匝藤吾馆召肿莆珊胯旦洞孝唾漳存呆蒙扛伏派蔷血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定混匀,37℃保温15min,以空白管调零,505nm波长处测定各管吸光度值。计算血糖含量=A样/A标×标准溶液浓度稽伸膊井棋霹揍散涯枯刷忌纶恒极间荐瓮功惟弧实娩密墒箭煌构实教辙咽血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定加入物(ul)A1A2A3A4A5A6A7A8A9A10A11葡萄糖标准液33蒸馏水3兔血浆①33②33③33④33工作试剂300300300300300300300300300300300言均螟鸥晕沙雁题野勿糯茅抄磁橙搞鸟竟孰础疡熊够沁盼疵叔屋补崖携断血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定混匀置于37℃孵育箱,反应10min后,在酶标仪上进行比色测定,测定波长为492nm,用空白管A1调零,读取标准管及测定管吸光度。葫塔臼宝茶班筐翌攀亿拣标充菲昼丰死炯秦缉楼荐桐旱溃心徽非怎攒观唇血糖影响因素及血糖测定血糖影响因素及血糖测定
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