鉴别(精简.doc

显微鉴别实验准备::显微镜,镊子,解剖针,载玻片,盖玻片,酒精灯,单面刀片,粉碎机,绘图板,铅笔等。:水合氯醛试剂,甘油醋酸试液(斯氏液),稀甘油试剂,甘油-乙醇溶液,苏丹Ⅲ试液,钌红试液,间苯三酚试液,碘试液,硝铬酸试液,α-萘酚试液,硝酸汞试液,氯化锌碘试液,不同浓度的乙醇溶液等。切片制作标本片粉末制片表面标本片解离组织片花粉粒与孢子制片磨片制片常用制片方式:徒手切片,粉末制片、表面标本片:解离组织片:花粉粒与孢子制片:磨片:一、切片制作标本片药材的预处理:先将药材表面泥沙刷洗干净,将应观察的部位,切成适当大小的块或段,一般以宽1cm、长3cm为宜,切面削平整。质地软硬适中的药材可直接进行切片;质地坚硬的则须先使其软化后再切片。徒手切片:在检验工作中,此法最常用,操作简便,迅速,制成的切片保持其细胞内含物的固有形态,便于进行各种显微化学反应观察。二、粉末制片:主要用于粉末状的药材及药材粉末制成的成方制剂观察。(1)粉末制备:药材要先干燥,磨或锉成细粉,装瓶,贴上标签。粉末制备时,注意取样的代表性,应注意各部位的全面性,例如:根要切取根头、根中段及根尾等部位,必须全部磨成粉,不得丢弃渣头。并需通过4号筛,混合均匀。干燥时,一般温度不能超过60℃,避免经常受温,使淀粉糊化,难以观察其完整者。表面标本片:主要用于叶类、花类(萼片、花瓣)、果实、草质茎及鳞茎等药材的表面特征如毛茸、气孔、表皮细胞等的观察。质地菲薄的药材可以整体装片;较厚的药材则须撕下表皮然后装片。解离组织片:适用于厚壁组织或输导组织等的单个细胞的显微观察。将样品切成段(长约5mm,粗约2mm)或片(厚约1mm),对于木类或茎类木质部,最好切成纵长的小段。然后根据细胞壁的性质,按照下列方法之一进行处理:如样品坚硬,木化组织罗多或集成较大群束,可用硝铬酸法或氯酸钾法;对于薄壁组织占大部分或分散存在的样品,可用氢氧化钾法。花粉粒与孢子制片:取花粉、花药(或小的花)或孢子囊群(干燥样品浸于冰醋酸中软化),用玻璃棒捣碎,纱布过滤,滤液置离心管中,离心,取沉淀加新鲜配制的醋酐与硫酸(9:1)的混合液1~3ml,置水浴上加热2~3分钟,离心,取沉淀,用水洗涤2次,加50%甘油与1%苯酚3~4滴,用品红甘油胶封藏观察。也可直接用水合氯醛试液装片,具体操作同粉末标本片。磨片:凡需观察断面,以一般切片无法制作的标本,如坚硬的动物类药材珍珠、石决明、动物骨骼、矿物药等可采用磨片法制片。片的厚度一般为20~50μm。磨片方法有手工制与机器磨制。中药成方制剂的鉴别:按剂型不同,分别将样品处理后,按粉末制片法装片观察。散剂、胶囊剂:可直接取出粉末装片或透化装片。片剂:可取2~3片研细后,取粉末适量装片或透化装片。水丸剂:可取数丸置乳钵中(若系包衣水丸,可刮除包衣)研细,取粉末适量装片,或取粉末适量置小容器内,加水合氯醛液透化(加适量甘油以防水合氯醛结晶析出),搅匀,用吸管吸取混悬液装片。蜜丸剂:样品可用两种方法处理:①用解剖刀沿蜜丸正中切开,从切面由外至内刮取少许样品,置载玻片中央偏右,滴加适宜的试液,用玻璃棒搅匀。按上述粉末制片法制片,或透化装片。②将样品切碎放入容器,加水搅洗涤,然后置离心管中离心沉淀,如此反复以除尽蜂蜜后,取沉淀或透化后装片。含挥发性成分的制剂:取其粉末进行微量升华装片。粉末制片方法与操作:用解剖针挑取粉末少许,置载玻片的中央偏右的位置,加适宜的试液1滴,用针搅匀(如为酸或咸时应用细玻棒代替针)。待液体渗入粉末时,用左手食指怀拇指夹持盖玻片的边缘,使其左侧与药液层左侧接触,再用右手持小镊子或解剖针托住盖玻片的右侧,轻轻下放,则液体逐渐扩延充满盖玻片下方。如液体未充满盖玻片,应从空隙相对边缘滴加液体,以防产生气泡;若液体过多,用滤纸片吸去溢出的液体,最后在载玻片的左端贴上检品的标签或书写上标记。。粉碎用具用完后,必须处理干净,干燥后才能使用于另一种药材。盖玻片和载玻片应绝对干净。新片要用洗液浸泡或用肥皂水煮半小时取出,先用流水冲洗后,再用蒸馏水冲洗1~2次后,置于70%~90%乙醇中,备用。。显微鉴别实验时,应先观察淀粉粒((斯氏液))、菊糖橙皮苷结晶(水合氯醛试液装片不加热,观察水溶性内含物)等,再用水合氯醛试液加热透化,观察其他显微特征,用稀甘油装片观察糊粉粒。鉴别成方制剂前,应了解处方组成和制法,分析处方中各种饮片的主要鉴别特征及用量的多少。。粉末加液体搅拌及加盖玻片时容易产生气泡。如用水或甘油装片时,可先加少量乙醇使其润湿,可避免或减少气泡的形成,或反复将盖玻片沿一侧轻抬,亦可使多数气泡逸出。搅拌时产生的气泡可随时用针将其移出。装片用的液体如易挥发,应装片后立即观察。用水装片也较易蒸发而干涸,通常滴加少许甘