法医鉴定试剂盒Profiler及COfiler中文操作手册.doc

亲子鉴定简明实验操作ProfilerPlus&COfilerKits(仅供参考,请阅读英文原版手册。),,浸泡过程中可以不时震动;15000rpm离心4min,尽量去净上清液,但可以视情况适当保留10uL左右的溶液,以免白细胞损失太多;加200uL10%(w/v)Chelex(50-100目;如200目用5%),,充分震荡;然后100C煮沸8min,离心,取6-20uL上清液作PCR。(uL)Reactionmix20GoldTaq(5U/uL)1PrimerSet10总体积50uLPCR循环条件为:95C11min→(94C1min→59C1min→72C1min)×28循环→60C45min→(uL)甲酰胺10GS-500[ROX]195C变性5min→迅速冰冷5min。:每组电泳(Project)需要包含至少一个Ladder;将SampleName栏的内容复制到SampleInfo栏,GenoTyper软件需要这些信息;请勿忘指定内标的颜色,用R。:Module用GSSTRPOP4(1ml)F。-2900点之间出现染料峰,3000点左右出现第一条红色分子量标记35bp带,6000点数据收集完毕;电泳时间24分钟,每个样品约需时半小时。,再选Project,建立一个新Project;在Project下拉菜单中选Addsamplefiles,然后依据样品文件所在路径找到并导入样品文件,包括Ladder;点击栏标题全选Samplefiles,在sample下拉菜单中选Installnewmatrix,然后依据Matrix文件所在的路径找到并导入与DyeSetF相匹配的Matrix文件,点击OK;SizeStd/DefineNew/输入各片段的bp数:50、75、100、139、150、160、200、250、300、340、350、400、450、490、500,其中250bp不定义,取名保存;所有样品均分别指定内标或共用该Project内电泳质量比较好的样品的内标;,软件自动完成计算;在Window下拉菜单中选择ResultsControl,选定欲看的样品,点击Display显示结果。先看内标(R),通过比较不同样品之间250bp带的计算结果是否相互接近,确认实验的重复性;再看其他颜色。保存Project。,Template启动后会自动启动GenoTyper软件。注意:如果启动的是GenoTyper本身,还要再启动有关Template才能进行基因自动分型。在File下拉菜单中选择Import,再选择FromGeneScanFile,选择所要分析的样品文件或GeneScanProject文件,点击OK。注意:每个Project中一定要有一个Ladder;Ladder文件必须在Samp