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动物实验的基本操作第一节 实验动物的捉拿、固定和编号方法在基础医学实验中,正确捉拿与固定动物,是实验工作的基础,也是实验顺利进行的保证。掌握正确捉拿、固定动物的目的就是防止实验者被动物咬伤抓伤,同时也是为了维持动物的正常生理活动,从而不影响实验观察结果。一、实验动物的捉拿与固定方法在基础医学实验中,最常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、蟾蜍、蛙、家兔和犬,现分别就其捉拿与固定方法依次予以介绍。1. 小鼠捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起,放在较粗糙的台面或鼠笼上,在其向前爬行时,右手向后拉尾(图5-1),用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤,将其置于左手心中,拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢(图5-2),右手即可作注射或其它实验操作。取尾血及尾静脉注射时,可将小鼠固定在金属或木制的固定器上(图5-11)。 图5-1   图5-2  2. 大鼠 方法基本与捉拿小鼠相同,但实验者事先应戴帆布防护手套。用右手将鼠尾抓住提起,放在较粗糙的台面或鼠笼上,抓住鼠尾向后轻拉,左手拇指和食指抓紧两耳和头颈部皮肤,余下三指紧捏鼠背部皮肤,如果大鼠后肢挣扎厉害,可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住,将整个鼠固定在左手中,右手进行操作。若进行手术或解剖,则应事先麻醉或处死,然后用棉线活结缚四肢,用棉线固定门齿,背卧位固定在大鼠固定板上。需取尾血及尾静脉注射时,可将其固定在大鼠固定盒里,将鼠尾留在外面供实验操作。3. 豚鼠 豚鼠具有胆小易惊的特性,因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是:先用右手掌迅速、轻轻地扣住豚鼠背部,抓住其肩中上方,以拇指和食指环握颈部,对于体型较大或怀孕的豚鼠,可用另一只手托住其臀部(图5-3、图5-4)。图5-4  图5-3  4. 蛙和蟾蜍 用左手将动物贴紧在手掌中,并以左手中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢,拇指和食指分别压住左、右前肢,右手进行操作。根据实验需要,可用图钉,采取俯卧位或仰卧位固定在蛙板上。抓取蟾蜍时,禁忌挤压两侧耳部毒腺,以免毒液射入眼中。 用右手把两耳轻轻地压于手心内,同时抓住颈部的被毛与皮肤。用左手托住其臀部,使其躯干的重量大部分集中在左手上(图5-5),然后按实验要求固定。做家兔耳血管注射或取血时,可用家兔盒固定。作各种手术时,可将家兔麻醉后固定在手术台上。固定方式分仰卧位和俯卧位,仰卧位固定时,四肢用粗棉线固定,头用家兔头固定夹固定或用棉线钩住家兔门齿后再固定在家兔台头端柱子上(图5-6)。进行头颅部手术时,多采用仰卧位固定配合马蹄形固定器进行。         图5-5图5-6 抓取犬时,需要用特制的长柄钳夹夹住其颈部,套上犬链,然后根据不同的实验要求将其固定。犬嘴的捆绑方法:取一圆形铁柱管(直径约1cm,长25cm,可用万能支架上的铁柱管代替)横贯置于犬齿后部的上下颌之间,用较宽的纱布从下颌绕到上颌打第1个结扣后,纱布的两端在铁柱管的两端靠犬的头部绕两圈固定。待固定牢靠后,纱布再绕向下颌打第2结扣,在铁柱管的两端靠犬的头部绕2圈固定,最后再绕到头颈后打第3个结扣。固定好后,可用手试着拉动或移动铁柱管,如铁柱管牢固,则证明犬嘴捆绑正确,否则需重新捆绑。如实验需要静脉注射时,可先使动物麻醉后再取下长柄夹,解绑,把动物放在实验台上,按实验要求固定。二、注意事项1捉拿固定某一动物之前,要对该动物的习性有一定的了解。2捉拿固定动物时须小心谨慎,大胆果断,但切不可粗暴。3大鼠牙齿锋利,为避免咬伤,捉拿动作要轻,不可鲁莽,如果大鼠过于凶猛,可待其安静后,再捉拿或用卵圆钳夹鼠颈部抓取。4捉拿动物过程中要以规范性的方法抓取和固定动物,要避免因动作粗暴而造成动物高级职称考试网的损伤。例如家兔这样的动物,不能采用抓双耳或抓提腹部的错误捉拿方法。5抓取大鼠或小鼠尾部时动作要轻,防止拉断鼠尾。不可提起动物玩耍!提起动物后,应迅速放在粗糙台面上。6捉拿动物过程中应防止被动物咬伤,若不慎被动物咬伤、抓伤。应及时用碘酒、乙醇消毒,随后到有关医疗机构诊治。三、实验动物的编号方法动物实验中,常用的编号标记有染色法、挂牌法、烙印法等3种方法。1. 染色法 染色法是用有色化学试剂在动物身体明显处如被毛、四肢等不同部位处进行涂染或用不同颜色来区别各组动物,是实验中最常用、最容易掌握的方法。使用的编号标记液有如下几种:3%-5%的苦味酸溶液(涂染黄色),2%硝酸银溶液(涂染咖啡色),%中性红或品红溶液(涂染红色)。编号原则是先左后右,从前到后。一般把涂在左前腿上的记为1号,左侧腹部记为2号,左后腿记为3号,头顶部记为4号,腰背部记为5号,尾基部记为6号,右前腿上的记为7号,右侧腰部记为8号,右后腿记为9号。若动物编号超过10或更大数字,可使用上述两种不同颜色的溶液,即把一种颜色作为个位数,另一种颜色作为十位数,这种交互使用可编到99号。例如把