生殖激素的测定雌节育..ppt

11第六节第六节生殖激素的测定生殖激素的测定22主要内容(六)主要内容(六)一、生物测定法(一、生物测定法(bioassaybioassay))二、免疫测定法二、免疫测定法((immunoassayimmunoassay))三、受体测定法三、受体测定法四、理化测定方法四、理化测定方法33一一、、常规生物测定法常规生物测定法生物活性生物活性::某生殖激素按一定比例稀释后某生殖激素按一定比例稀释后注射到大鼠、小鼠、公鸡注射到大鼠、小鼠、公鸡等等实验动物体内实验动物体内观察实验动物靶器官对激素的反应观察实验动物靶器官对激素的反应一个生物学单位一个生物学单位::实验动物中产生生物学效应的最低激素用量实验动物中产生生物学效应的最低激素用量如:如:大白鼠单位大白鼠单位、、、、或摘除卵巢或摘除卵巢22周后的大鼠或小鼠周后的大鼠或小鼠每组每组5~75~7只,每日皮下注射只,每日皮下注射1ng~20ng1ng~20ng标准激素标准激素连续注射连续注射7d7d第第8d8d取出子宫、剥离其附着组织,称重取出子宫、剥离其附着组织,称重标准曲线标准曲线::子宫重子宫重--纵座标、标准激素用量纵座标、标准激素用量--横座标横座标待测样本的生物学活性待测样本的生物学活性::待测样子宫重与标准曲线比较待测样子宫重与标准曲线比较66测定测定FSHFSH、、或或PMSGPMSG生物学活性生物学活性::::~~15ng连续注射三次连续注射三次最后一次注射激素第最后一次注射激素第24h24h开始开始隔隔12h12h作阴道涂片作阴道涂片检查有无角质化的上皮检查有无角质化的上皮阳性反应的百分比与标准剂量反应曲线比较阳性反应的百分比与标准剂量反应曲线比较88HCGHCG的生物活性的生物活性::::,每天于腹腔内注射一次日龄大鼠,每天于腹腔内注射一次连续连续3d3d,第,第4d4d((72h72h)取出卵巢称重)取出卵巢称重PMSGPMSG测定测定::灵敏度可达灵敏度可达22国际单位国际单位FSHFSH的测定的测定: : LHLH或或HCGHCG作为协同剂作为协同剂、、增强反应增强反应