2O12,28(4)中国人兽共患病学报ChineseJOurnalofZoonoses363文章编号:1002—2694(2O12)04—0363—04猴B病毒囊膜糖蛋白gD基因的克隆表达及其诊断价值评价*张文韬,董罡,袁菊芳。,马兰芝,张广州,曾林,叶华虎,聂奎摘要:目的克隆表达猴B病毒囊膜糖蛋白gD胞外区片段,评价其诊断价值,为猴B病毒快速鉴别诊断技术建立和疫苗研制奠定基础。方法利用PCR扩增gD胞外区基因片段,测序正确后插入原核表达载体pET28b(+)。重组质粒转化至大肠杆菌(BI21)DE3并进行诱导表达。纯化蛋白首先以His抗体和B病毒阳性血清进行鉴定,再用ElISA评价其诊断价值。结果目的蛋白为包涵体,占菌体总蛋白的35,分子量约为48kD。Western印迹显示,重组蛋白能与猴B病毒阳性血清和His单克隆抗体发生免疫反应;32份标准阳性血清和3O份阴性血清的ElISA检测结果显示,。结论重组猴B病毒囊膜糖蛋白gD胞外区片段具有良好的反应原性,可作为猴B病毒血清学检测的候选抗原。关键词:猴B病毒;重组囊膜蛋白gD;血清学检测中图分类号:$:binantmonkeyBvirusglycoproteinDandevaluationofitsdiagnosticpotentialZHANGWen—tao,DONGGang,YUANJu—fang,MALan—zhi,ZHANGGuang—zhou,ZENGLin,YEHua—hu,NIEKui(CollegeofAnimalScience&Technology,SouthwestUniversity,Chongqing400715,China)ABSTRACT:ThedetectionO{humorallmmuneresponsesisthemethodO{choicefortherapididentificationO{Bvirus—in—,,theextracellulardomaingeneofglycoproteinDwasamplifiedbyPCRandclonedintotheprokaryoticexpressivevectorpET一28b(+)(DE3),,accountedfor35totalproteins,
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