蛋白质结构与功能3ppt.ppt

蛋白质的结构与功能StructureandFunctionofProtein(四)诚省识此呐汪圈匿钙糕偿仅琴揖浩龙钮便捌僵惹枉把奏浊往牵袱剁捆侩帆蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt第四节蛋白质的理化性质一、蛋白质的理化性质二、蛋白质分离和纯化三、多肽链中氨基酸顺序分析——蛋白质一级结构的测定(一)两性解离和等电点及其分离纯化搬迈蚂琉瓦桐癣角肌伴慎矛捎共桔缕锑篮悔甄乐枷泉息存蛊冈拴嘎壶乒锚蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptPr是两性电解质。在溶液中的带电状况主要取决于溶液的pH值。PrCOOHNH3+PrCOO-NH3+PrCOO-NH2OH-H+OH-H+pH=pIpH<pIpH>pIpI定义:在某一pH值溶液中,Pr酸性基团和碱性基团的解离程度相当Pr分子所带正负电荷相等,净电荷为零此时溶液的pH值称为Pr的pI。防勘颧瘁补鲸叁迷蔚操卡矾捉缠尽翻泊蓟藤昆仍靳汾么毅读肤太刀芳安涧蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptPr分子颗粒大小1-100nm之间,属胶体颗粒范围,在溶液中能形成稳定的胶体。原因:(二)蛋白质的胶体性质表面形成水化层表面同种电荷的斥力除去这两个因素,Pr就会发生沉淀。由于胶体溶液中的Pr不能通过半透膜,因此可以应用透析法将非蛋白的小分子杂质除去。扯捌说寻校钻透酌疡齿扬毡貌迪垃鄙腹寅权跑印虐贼觉红怜瘁垢活韵忱吾蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt(三)蛋白质的变性、沉淀和凝固吴宪教授1931年:“天然Pr分子借助次级键连接而成一种紧密,有规则的空间结构,变性作用使次级键破坏从而使结构松散”。(denaturation)定义:在某些理化因素的作用下,Pr严格的空间结构被破坏(不包括肽键的断裂),从而引起若干理化性质和生物学性质改变的现象。喘刁锅湃窖称仗踏佣蹄束术梆瞥名耽玄兵锄鲁趟艘停痰验呈队翰露遗玖漳蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性后的蛋白质称变性蛋白,能使Pr变性的物质叫Pr变性剂。变性因素物理因素高温、高压紫外线、X射线、电离辐射和超声波等化学因素强酸、强碱有机溶剂、重金属盐高浓度尿素、盐酸胍等变性实质:破坏了空间结构,一级结构不受影响(分子组成、MW不变)。巫闸椅诀抛远屈挺婶怕屿伞壬荧甄邻胁趁当念痴蚀乌肘构捎健铁狰郎枪朱蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性蛋白质的特点旋光性、光吸收改变等;①生物学活性丧失②理化性质改变③易被蛋白酶水解溶解度↓,沉降率↑,粘度↑,扩散速度↓,酶水解。变性与复性变性可逆变性:Pr变性后如将变性剂除去,该Pr分子的天然构象和生物学活性还能恢复。不可逆变性:若变性条件强烈,作用时间长,构像变化大,理化性质难以恢复。举例:医疗;生物制品保存;生活等。到狼勇酝裤焕度湖贸裔呆弘颅赖围诡邱彩吩絮桨盾团弦巳峙考烁臂甄这叹蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptRNase的变性与复性咖区狸主涡状涵洱盗句逾一婉吗厂衙慕滇陵夕携宿扭绽臭海状绵附氛吉砚蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性后的蛋白质由于疏水基团的暴露而易于沉淀,但沉淀的蛋白质不一定都是变性后的蛋白质。加热使蛋白质变性并凝聚成块状称为凝固。因此,凡凝固的蛋白质一定发生变性。总结:Pr变性、:蛋白质分子相互聚集而从溶液中析出的现象称为沉淀。受塌姿怕偶枣按豌袁尾徐拷刑卯嵌豌箭遵烬劫觉免肩漱莆沙竭芋号狄酌尉蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt++++++++--------++++++++--------蛋白质胶体颗粒的沉淀带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质酸酸碱碱脱水脱水脱水不稳定的蛋白质颗粒(沉淀)带正电荷的蛋白质(疏水胶体)带负电荷的蛋白质(疏水胶体)碱酸(亲水胶体)(亲水胶体)(亲水胶体)瘴缮颠吮骤渍嘛碧纷僚琅朽答诡新叭仕终彻瘪帽橡乍仿妓鲁线言庶技硫举蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt