发酵液(或培养液)的预处理方法预处理和固液分离的目的:1、分离细胞、菌体和其它悬浮颗粒(细胞碎片、核酸和蛋白质的沉淀物)。2、除去部分可溶性杂质。3、改变滤液的物理性质(降低粘度等),以利于后继操作。总策略:1、胞外产物:应尽可能转移到液相中,常用调pH至酸性或碱性的方法来达到。2、胞内产物:首先收集细胞、破壁,生化物质释放到液相,再分离细胞碎片。3、通常,以含生化物质的液相为出发点,进行后继操作。一、发酵液的预处理1、改变液体物理性质,促进固液分离。细菌及某些放线菌菌体细小,发酵液粘度大,不能直接过滤,由于菌体自溶,核酸、蛋白质及其它有机粘性物质的存在会造成滤液浑浊,滤速极慢,因此,在预处理中应采用絮凝或凝聚的方法,设法增大悬浮液中固体粒子的大小,提高其沉降速度,或采用稀释、加热等方法降低粘度,以利于过滤。必要性:2、发酵液杂质很多,其中影响最大的是高价无机离子和杂蛋白,预处理时,应尽量除去。高价无机离子危害:在采用离子交换法提炼时,影响树脂的交换容量。杂蛋白质的危害:离子交换法和大网格树脂吸附法提炼时,会降低吸附能力,萃取时,易产生乳化。过滤或膜过滤时,使滤速下降,膜受到污染。(一)、凝聚和絮凝凝聚:在中性盐电解质作用下,破坏胶体粒子的分散状态使之聚集的过程。絮凝:指在某些高分子絮凝剂存在下,在悬浮粒子之间产生架桥作用,使胶粒形成粗大的絮凝团的过程。基本概念:凝聚和絮凝技术能有效地改变细胞、菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态,使聚集起来,增大体积,以便于过滤。常用于菌体细小而且粘度大的发酵液的预处理。一般来说,反离子的价数越高,该值就越小,即凝聚能力越强。阳离子对带负电荷的胶粒凝聚能力的次序:常用的凝聚剂电解质有:Al(OH)3、Fe3O4、Ca(OH)2、石灰等
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