包虫病样品的采集、运送、保存和检测达坂城区疾控中心1.(一)标本的采集和保存1、人体血清样本的采集用真空采血管在无菌条件下采集人体静脉血液3~5ml,37℃温箱1小时后,置于4℃冰箱内3–4小时,待血块凝固,经3000rpm离心15分钟后,吸取血清置入2ml样品保存管中,封口,写明样本编号、姓名、采集地点等信息,存放于4℃冰箱内(立即检测),如不马上进行检测,则需冷冻于-20℃待检。当需要将血清送往距离较远的实验室检验时,则必须将冷冻血清用保温设备运送,否则应加硫柳汞防腐。、中间宿主动物棘球蚴和囊液的采集采自屠宰场带包虫囊的绵羊等中间宿主动物病脏,用75%的酒精擦洗表面后,用带有16号针头的一次性注射器抽取囊液,减压,用无菌管收集囊液。剪开包囊取出内囊,用带有双抗的PBS冲洗,沉淀原头蚴,收集沉淀去上清,镜检。将囊液保存于-20℃、-86℃冰箱,原头蚴和内囊皮保存于-20℃、-86℃冰箱或95%的酒精中进行分子生物学检测。、粪便样本的采集在粪抗原试验中,可用采粪器从犬直肠或地面上直接采取新鲜粪便样本,然后以缓冲溶液相混和,或在冰箱低温下(—86℃)冷冻一周以上进行粪抗原检测。样品避免反复冻融。4.(二)标本的运送待检样本的运输应根据国家有关规定实施。血清标本应置入含有冰袋的冷冻转运箱中进行运送;犬粪和棘球绦虫的虫体和虫卵应置于密闭、耐压、冷藏的转运箱中,专人送往实验室。5.(三)标本的检测按中华人民共和国包虫病诊断标准(WS257-2006)规定的检测方法进行检测。1、血清学检测(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)(2)间接红细胞凝集试验(IHA)(3)PVC薄膜快速ELISA (4)免疫印迹技术(Westernblot,WB)(5)循环抗原检测(circulatingantigen,cAg)(6)循环免疫复合物检测(plex,CIC)6.
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