细胞色素C小组成员:潘炯琛、吕武燕、汪晨蕴、臧月梅、蔡晨、:包括多种能够传递电子的含铁蛋白质的总称。它广泛存在于各种动物、植物组织和微生物中。细胞色素C是呼吸链中极重要的电子传递体。它主要存在于线粒体中,需氧最多的组织如心肌及酵母细胞中,细胞色素C含量丰富。:分子质量约为13000,蛋白质部分由104个左右的氨基酸残基组成,其中赖氨酸含量较高,为碱性蛋白。-,-%。易溶于水,在酸性溶液中溶解度更大,故可用酸性水溶液提取。,故可分为氧化性和还原性,前者水溶液呈深红色,后者水溶液呈桃红色。细胞色素C对热,酸和碱都比较稳定,但三氯乙酸和乙酸可使之变性,引起部分失活。细胞色素C粗品是还原型和氧化型两种产品的混合物, 在测定含量时, 要加入联二亚硫酸钠, 使混合物中的氧化型转变为还原型,还原型细胞色素C水溶液在波长520nm 处有最大吸收值。。在临床上可以纠正由于细胞呼吸障碍引起的一系列缺氧症状,使其物质代谢、细胞呼吸恢复正常,病情得到缓解或痊愈。如:一氧化碳中毒、催眠药中毒、新生儿窒息、严重休克缺氧、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困难、高山缺氧、脑缺氧、心脏疾病引起的缺氧等。, 故采用酸化水提取。人造沸石为铝酸钠,它是一种阳离子交换剂,细胞色素C分子刚好进入它的表面空隙。 呈正电荷,它可与沸石分子上的钠离子发生交换,从而被沸石吸附。装入层析柱后,用25%硫酸铵洗脱,可将细胞色素C 交换下来。硫酸铵主要是降低沸石对细胞色素C 的亲和力。硫酸铵盐析可明显提高细胞色素C 纯度,主要为去除杂蛋白。另外三氯乙酸可引起细胞色素C 变性和聚合,必须严格控制三氯乙酸用量。、PH6、、NaCl、硫酸铵洗脱液硫酸铵盐析滤液TCA沉淀、离心沉淀物蒸馏水细胞色素C粗品溶液硫酸、(冷冻)猪心样品(200g)1mol/LH2SO4:500mL1mol/LNH4OH:500mL12%BaCl2:250mL25%(NH4)2SO4:%NaCl:500mL20%三氯乙酸(TCA):100mL人造沸石:白色颗粒,40-60目联二亚硫酸钠细胞色素C标准液(3mg/ml),电磁搅拌器,离心机,分光光度计,烧杯(1000ml,500ml,200ml,50ml各若干),量筒,移液管,玻璃漏斗,玻璃棒,纱布,滤纸,容量瓶,试管,离心管10.
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