溶磷微生物分离、应用及其相关基因的克隆与功能鉴定.pdf

密级: 论文编号: 中国农业科学院学位论文溶磷微生物分离、应用及其相关基因的克隆与功能鉴定 Screening and Application ofPhosphate-dissolving Strains and Its Gene Cloning and Identification 博士研究生:龚明波指导教师:朱昌雄研究员申请学位类别:农学博士专业:农业微生物研究方向:环境微生物培养单位:农业环境与可持续发展研究所研究生院提交日期201 1年6月 Secrecy: No. Chinese Academy ofAgricultural Sciences Screening andApplication ofPhosphate·-dissolving Strains and ItsGene Cloning and Identification :Gong Mingbo Supervisor- Changxiong Major: Specialty: Institute: AppliedMicrobiology Graduate School ofChinese Academy of Agricultural Sciences June 2011 独创性:声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:窭I阀Ⅵ参时间: ⅥI,年6月二J日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用+. 不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:警峭壮时间:劫,『年6月q日翩躲矧易帆~、答辩委员会签名表论文题目溶磷微生物分离、应用及其相关基因的克隆与功能鉴定论文作者龚明波专业农业微生物研究方向环境微生物指导教师朱昌雄培养单位(研究所、中心) 环发所硕(博) 姓名职称单位专业签名导师硕导口\\ 评博导口硕导口\\ 阅博导口人\\ 硕导口博导口经辩硕导口,辛动刘主宋渊教授中博导√硕导口锄零. 蒋细良研究员中国农业科学院植保所环境科学博导√硕导口历昂;& 姜瑞波研究员中国农业科学院区划所农业微生物学博导√答硕导口中科院微生物所微生物学李应李少杰研究员博导√辩菩梭李俊..研究员硕导口中国农业科学院区划所农业微生物委博导√袁红莉教授硕导口中国农业大学生物学院微生物学瓤编博导√员硕导口 V—’r 7●J 张杰研究员中国农业科学院植保所农业微生物鸫博导√硕导口博导口会议记录(秘书) 刘雪论文答辩时间地点 2011年6月15日下午1:30 环发所行政楼404 摘要从适应土壤定殖的溶磷微生物中筛选到一株适应生产的溶磷真菌,并进行了其土壤溶磷特性和溶磷机理初步研究,选取溶磷效果较好的菌株进行了溶磷相关基因的克隆、表达和功能鉴定,取得以下主要结果: 在磷酸三钙为唯一磷源的无机盐培养基上。以透明圈为指示,通过初筛和复筛,获得效果稳定的细菌23株,分属6个属11个种;真菌16株,其中有9株草酸青霉(Penic册um oxalicum), 2株变幻青霉(Penicilliumvariabile),l株刺孢青霉(Penicillium aculeatum)、1株绿色木霉(Trichoderma viride)、2株黑曲霉(Aspergillus niger)、l株构巢曲霉(Aspergillus nidulans)。菌株对不同难溶磷(磷酸三钙、磷酸锌、磷酸铝和磷酸铁)的溶解能力实验表明:细菌对不同种类难溶磷溶解能力差异显著,真菌的溶磷效果显著高于细菌,16株真菌显著降低PDB 培养液的pH值,,固体培养基上培养5 d能将各种难溶磷全部溶解。通过16株真菌在不同土壤中的定殖能力和释放难溶磷的效果比较,筛选土壤中定殖和溶磷效果好的菌株。土培实验结果表明:真菌在土壤中具有较强的定殖能力;不同土壤中真菌的定殖能力差异显著,同一种的真菌在土壤中的定殖能力也差异显著。真菌释放土壤难溶磷的能力与其土壤定殖的能力显著相关,菌株定殖能力越强,释放土壤难溶磷效果越好。其中,真菌 Z33、Zh、ZC、zh3、Z11、Z15、ZQ3和Z30在土壤中定殖效果