发酵生产中还原糖和葡萄糖检测指标的分析.doc

发酵生产中还原糖和葡萄糖检测指标的分析.doc发酵生产中还原糖和葡萄糖检测指标的分析史建国杨俊慧孟庆军杨艳马耀宏张利群(山东省科学院生物研究所,济南,250014)摘要采用还原糖测定法和葡萄糖酶电极测定法,对谷氨酸发酵生产上淀粉糖原料和发酵液中还原糖和衙萄糖进行了测定,对其变化的特点和意义进行了研究。结果表明:淀粉糖液中葡萄糖/还原糖比值变化从80%-%;发酵过程中,谷氨酸生产菌首先消耗葡萄糖,发酵28h,葡萄糖含量接近零,%;还原糖测定仪用于发酵后期还原糖测定,精密度(RSD%),对发酵后期的精确控制具有一定的应用价值。关键词还原糖,葡萄糖,发酵过程控制微生物发酵生产中常以淀粉为基木原料,经水解生成还原糖或匍萄糖,供发酵使用。糖的检测是生产过程控制的常规生化指标⑴。近年来,还原糖测定仪和葡萄糖测定仪已在发酵生产中应用,并逐步取代传统的手工滴定法,实现了还原糖和葡萄糖快速、准确的仪器化分析,大大减少了人为测定的误差2役但由于测定原理和方法的不同,使测定结果岀现了差异。本文对多年来在谷氨酸发酵生产中测定的还原糖和匍萄糖结果进行了总结,对还原糖和葡萄糖检测指标进行了比较和分析,对发酵生产中仪器分析方法的应用特点和意义进行了探讨。1材料和方法实验材料淀粉水解液糖化液为莲花集团不同的糖化车间的送检样品;谷氨酸发酵液为菱花集团三分厂送检样品;化学试剂均为分析纯,用蒸憎水配制。实验方法121还原糖测定(1)斐林试剂滴定法采用国家标准测定法(GI3/—1985)(2)还原糖测定仪采用山东科学院生物中心提供的SGD-TTI型还原糖测定仪。该仪器测定原理同还原糖斐林试剂滴定法。测定方法如下:接通电源(220V),按“开/关”键,自动启动准备程序;用微量注射器将标准品注入反应池,完成后自动定标;测定时,用微量注射器将被测样品注入反应池,仪器口动完成测定过程,并显示和打卬测定值。-40型谷氨酸-葡萄糖双功能分析仪。其原理是葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下催化葡萄糖,在过氧化氢型电极上产生电流。该电流值与衙萄糖的浓度有线性比例关系。测定方法如下:仪器开机后,自动进入清洗过程°当仪器出现进样指令后,用微量进样器取25uL标准溶液注入反丿应池,仪器自动显示校正结果。测定时,用微量进样器取25nL样品液注入反应池,20s后仪器自动显示或打印测定值。2结果与讨论1淀粉糖样品中还原糖和葡萄糖测定将糖化车间送检的淀粉糖化液分别稀释。还原糖测定吋稀释糖浓度至1%以内,采用费林氏剂滴定法测定;%以内,采用葡萄糖酶电极分析仪测定。测定值乘以稀释倍数为测定结果(表1)。该试验所提供的糖化样品DE值都在95以上,且颜色浅,透光率好,按常规质量标准衡量基本一致。但样品中葡萄糖/还原糖值变化较大。由表1可以看岀:匍萄糖/还原糖比值变化从80%-%;其中,11、%,而葡萄糖/还原糖比值相差8%以上。因此,采用发酵生产中葡萄糖和还原糖的测定对常规糖质量控制标具有一定的应用价值。表1淀粉糖液中还原糖和葡萄糖测定结果样品还原糖(%)葡萄糖(%)葡萄糖/还原糖(%)