细胞凝集反应实验报告.docx

们的总称。凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,它们具有的某些特性,能被免疫细胞化学技术方法所应用。血型鉴别实验,也是凝集反应的一种。细胞生物学实验报告一. 实验名称:细胞凝集反应二. 实验原理:细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构, 脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,因其能凝集红血球(含血型物质),故名凝集素。常用的为植物凝集素(Phytoagglutin,PNA),通常以其被提取的植物命名,如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheatgermagglutinin,WGA)、花生凝集素(Peanutagglutinin,PNA)和大豆凝集素(Soybeanagglutinin,SBA)等,凝集素是它“亲合”三. 实验用品:土豆块茎显微镜,粗天平,载玻片,滴管 2支,离心管2支PBS缓冲液:,,,加蒸馏水,定容至1000ml,%的红细胞四. 实验步骤:称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),加生理盐水3ml,在1000r/min,离心5min,重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充分混匀。同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴,置双凹片右孔内,充分混匀,做对照实验。摇晃5—10min后,观察有无发生细胞凝集并置显微镜下观察。:试剂土豆凝集素PBS缓冲液在振荡过程中,溶液中在振荡过程中,红细胞的红细胞渐渐凝集成颗不断向中间靠拢,最终现象粒状,逐渐聚拢,最后形成中间颜色较深,边在液滴中形成一大块血缘颜色较浅的红细胞浑红色血块。浊溶液。结果红细胞发生凝集红细胞未发生凝集说明结论土