学习指导即时感悟一、学习目标 1 、说出基因工程的四步基本操作程序 2 、叙述反转录法获取目的基因的过程 3 、说出基因文库的概念及两种类型 4 、说明 PCR 技术的原理、条件及过程 5 、了解基因表达载体的构建。二、学习重点及难点 1 、从基因文库中获取目的基因。 2 、利用 PCR 技术扩增目的基因【自主预习】 1、用流程图表示基因工程基本操作程序的四个步骤: 2 、目的基因的获取(1 )来源:目的基因可以从____________________________ ,也可以用_________________ 。(2 )概念:目的基因主要是指____________________ ,也可以是一些____________________________ 。(3) 方法: 获取目的基因的方法有以下几种: ________________________ 、_____________________________ 、。 3 、基因表达载体的构建基因工程的核心是___________________ 。一个基因表达载体的组成除了________ 外,还必须有______ 、______ 以及________ 等。三、同学们,通过自主预习,还有哪些疑惑呢? 【自主·合作· 探究】探究一从基因文库中获取目的基因 1、为什么要建立基因文库?怎么建立的? 疑惑点疑惑内容 2 、如何从基因文库中获取目的基因? 例1 、构建基因组 DNA 文库时,首先应分离细胞的() A 、染色体 DNA B 、线粒体 DNA C 、总 mRNA D、 tRNA 例2 、目的基因可从基因文库中获得,下列有关基因文库的描述正确的是() A 、某生物的全套基因就是一个基因文库 B 、将含有某种生物不同的许多 DNA 片段,导入某个生物体内,则这个生物就是一个基因文库 C 、含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库 D 、含有一种生物的一部分基因的基因文库叫 cDNA 文库探究二利用 PCR 技术扩增目的基因 1、 PCR 技术的原理是什么? 2、 PCR 技术扩增的过程是? 例3 、在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最方便方法是() A 、化学合成法 B 、基因组文库法 C、 cDNA 文库法 D 、聚合酶链反应例4 、下列获取目的基因的方法中需要模板链的是() ①从基因文库中获取目的基因②利用 PCR 技术扩增目的基因③反转录法④通过 DNA 合成仪利用化学方法人工合成 A. ①②③④ B. ①②③ C. ②③④ D. ②③探究三基因表达载体的构建 1. 作为基因工程表达载体,只需含有目的基因就可以完成任务吗?为什么? 2 、基因表达载体的构成包括哪些元件?他们的作用是什么? (绘制基因表达载体的模式图) 例5、(多选)一个基因表达载体的构建应包括( ) A .目的基因 B .启动子 C .终止子 D .标记基因例6 、下列关于基因表达载体的叙述不正确的是( ) A .启动子是与 RNA 聚合酶识别和结合的部位,是起始密码 B .启动子和终止子都是特殊结构的 DNA 短片段,对 mRNA 的转录起调控作用C .标记基因是为了鉴别受体细胞中是否有目的基因从而便于筛选 D .基因表达载体的构建视受体细胞及导入方式不同而有所差别反思总结 1、基因工程的操作步骤: ①制备重组
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