草鱼鱼鳞胶原蛋白提取分离工艺研究.pdf

II 中文摘要胶原蛋白(collagen)是一种白色、不透明、无支链的纤维蛋白质。分子量为 30万道尔顿。胶原蛋白是人体留住钙质的主要成分之一,对人体的生长、发育具有极其重要的作用。鱼鳞含有丰富的胶原蛋白,可作为胶原蛋白提取的原料。以草鱼鱼鳞为材料,对胶原白蛋提取工艺进行考察、摸索,并对提取结果进行分析。鱼鳞的主要成分有水分、灰分、粗蛋白、少量的鸟嘌呤和卵磷脂。对鱼鳞进行主要成分测定,可得到其中水分、灰分、%、%、%; %。脱钙工艺:以单因素设计分析得出最优脱钙方式。具体脱钙参数为:EDTA浓度 、脱钙时间24h、料液比1:50、脱钙温度25℃,脱钙两次。超声波辅助脱钙的结果表明,超声波辅助脱钙的效果并不明显。除杂蛋白工艺:分析除杂单因素试验的结果,得出具体的除杂参数为:料液比 1:40、、脱杂时间6h、脱杂温度20℃,除杂三次。超声波辅助除杂对于除杂效果有一定帮助,在超声波频率为60Hz时除杂效果较好。酸溶性胶原蛋白(Acid-soluble collagens)提取工艺:以经过前处理过程的草鱼鱼鳞为原料,以醋酸浓度、提取时间和提取温度作为影响因子,进行单因素提取研究;为了更准确的分析各个因素的相互交互影响,采用响应面法分析了醋酸浓度(A)、提取时间(B)和提取温度(C)对ASC提取率的影响,方差分析表明,对提取影响最显著的是温度(C),其次是提取时间(B)和醋酸浓度(A)。提取的最佳工艺条件为: 、、提取温度28℃。在此条件下,%。由于考虑实际操作的可行性和方便性,取乙酸浓度1mol/L、提取时间25h、提取温度28℃作为实际操作工艺条件。此后进行的验证试验结果表明,该最佳工艺条件下提取的可重复性较好,结果稳定可靠。酶溶性胶原蛋白(Pepsin-soluble collagens)提取工艺:以经过前处理过程的草鱼鱼鳞为原料,以料液比、提取温度、提取时间和加酶量作为影响因子,进行单因素提取研究;为了更准确的分析各个因素的相互交互影响,采用响应面法分析了料液比(A)、提取温度(B)、提取时间(C)和加酶量(D)对PSC提取率的影响,方差分析表明,对提取率影响显著的是料液比(A),其次是提取温度(B)、加酶量(D)和提取时间(C)。提取的最佳工艺条件为:料液比1:77、温度25℃、时间24h、%。在此条件下,%。由于考虑实际操作的可行性和方便性,取料液比1:77、提取时间24h、提取温度25℃,%作为实际操作。此后进行的验证试验结果表明,该最佳工艺条件下提取的可重复性较好,结果稳定可 II 靠。对ASC和PSC的粗提物进行纯化,%%。胶原蛋白氨基酸分析结果为:% %,%%。对比本研究的提取胶原蛋白氨基酸分析结果与前人Ⅰ型胶原蛋白氨基酸分析结果,可以看出,草鱼鱼鳞胶原蛋白为典型的Ⅰ型胶原蛋白,ASC和PSC提取工艺参数研究结果可靠。关键词:鱼鳞,羟脯氨酸,提取,工艺参数,胶原蛋白 i Abstract Fish scales accounted for % of the total mass of the scales are rich in protein and various minerals. It posed of protein and accounted for 50% to 70% of the total mass of fish scales .Protein posed of collagen and keratin and a small amount of China's rich yield of freshwater fish,processing and utilization of fish scales is not enough and waste seriously. Collagen is a white, opaque, unbranched fiber protein, a molecular weight of 300,000 dalt