人肿瘤坏死因子α转化酶(tace)elisa检测试剂盒说明书资料.doc

人肿瘤坏死因子α转化酶( TACE ) ELISA 检测试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆樊克生物专业供应: 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本肿瘤坏死因子α转化酶( TACE ) 含量。试验原理: TACE 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验( ELISA ). 已知 TACE 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将 TACE 和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后, 加入亲和素标记过的 HRP 。再经过温育和洗涤, 去除未结合的酶结合物,然后加入底物 A、B ,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中 TACE 的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份( 2-8 ℃保存) 96孔配置 48孔配置配制 96/48 人份酶标板 1块板( 96T )半块板( 48T )即用型塑料膜板盖 1块半块即用型标准品: 80ng/ml 1瓶( )1瓶( )按说明书进行稀稀空白对照 1瓶( )1瓶( )即用型标准品稀释缓冲液 1瓶( 5ml )1瓶( )即用型生物素标记的抗 TACE 抗体 1瓶( 6ml )1瓶( )即用型亲和链酶素-HRP 1瓶( 10ml )1瓶( )即用型洗涤缓冲液 1瓶( 20ml )1瓶( 10ml )按说明书进行稀释底物 A1瓶( )1瓶( )即用型底物 B1瓶( )1瓶( )即用型终止液 1瓶( )1瓶( )即用型标本稀释液 1瓶( 12ml )1瓶( )即用型自备材料 1 . 蒸馏水。 2 . 加样器: 5ul 、 10ul 、 50ul 、 100ul 、 200ul 、 500ul 、 1000ul 。 3 . 振荡器及磁力搅拌器等。安全性 1. 避免直接接触终止液和底物 A、B 。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。 2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项 1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物 A、B 液时,避免使用带金属部分的加样器。 5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7. 底物 A 应挥发, 避免长时间打开盖子。底物 B 对光敏感, 避免长时间暴露于光下。避免用手接触, 有毒。实验完成后应立即读取 OD 值。 8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法 1、血清---- - 操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后, 1000 ×g 离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、血浆---- -EDTA 、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。 1000 ×g 离心 30