第二章第二章鸡胚接种技术鸡胚接种技术一、概况一、概况??1911 1911 年年Rous Rous 和和Murphy Murphy 首先应用鸡胚培养首先应用鸡胚培养研究肉瘤病毒研究肉瘤病毒( (Rous Rous 肉瘤肉瘤) )的繁殖。的繁殖。??1938 1938 年年Goodpasture Goodpasture 和 等应用鸡胚等应用鸡胚繁殖病毒、繁殖病毒、 Cox Cox 应用卵黄囊培养立克次体。应用卵黄囊培养立克次体。鸡胚培养法的鸡胚培养法的优点优点: : ??鸡胚的组织分化程度低,可选择适当途鸡胚的组织分化程度低,可选择适当途径接种,病毒易复制,感染病毒的膜和径接种,病毒易复制,感染病毒的膜和液体含大量病毒。液体含大量病毒。??鸡胚是一整体,有神经血管的分布及脏鸡胚是一整体,有神经血管的分布及脏器的构造。器的构造。??来源充足,操作简单,通常是无菌的, 来源充足,操作简单,通常是无菌的, 对接种的病毒不产生抗体。对接种的病毒不产生抗体。鸡胚培养法的鸡胚培养法的缺点缺点: : ??一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征。一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征。??卵黄中常常含有抗家禽病原体的母体抗体。卵黄中常常含有抗家禽病原体的母体抗体。??某些细菌、衣原体和病毒能够从感染的母鸡传递某些细菌、衣原体和病毒能够从感染的母鸡传递到鸡胚。到鸡胚。??通常鸡胚含有白血病病毒。通常鸡胚含有白血病病毒。??在鸡食物中加入抗菌素,母鸡吃后会传递给鸡在鸡食物中加入抗菌素,母鸡吃后会传递给鸡胚,鸡胚就会产生对立克次体和衣原体感染的抵胚,鸡胚就会产生对立克次体和衣原体感染的抵抗。抗。第一节第一节鸡胚的结构与生理鸡胚的结构与生理鸡胚是由三个胚层发育起来鸡胚是由三个胚层发育起来的,即的,即外胚层、中胚层和内胚外胚层、中胚层和内胚层层,它们构成胚胎的组织与器,它们构成胚胎的组织与器官。官。(约(约 10 10 日龄鸡胚的结构见图) 日龄鸡胚的结构见图) 卵壳与壳膜卵壳与壳膜卵壳位于最外层的坚硬壳层; 卵壳位于最外层的坚硬壳层; 壳膜位于卵壳的下层,允许气体和液体分子壳膜位于卵壳的下层,允许气体和液体分子交换,因此培养鸡胚需一定的湿度和气体。交换,因此培养鸡胚需一定的湿度和气体。气室气室功能主要是呼吸和调节压力。功能主要是呼吸和调节压力。绒毛尿囊膜绒毛尿囊膜壳膜之下,主要是胚胎的呼吸器官。壳膜之下,主要是胚胎的呼吸器官。羊膜羊膜胚胎的最内层包被,含羊水,胚胎在其中。胚胎的最内层包被,含羊水,胚胎在其中。尿囊腔尿囊腔位于绒毛尿囊腔和羊膜之间位于绒毛尿囊腔和羊膜之间,胚胎排泄器,胚胎排泄器官含官含 5 5- -20ml 20ml 尿囊液,含大量的尿酸盐, 尿囊液,含大量的尿酸盐, 为减少沉淀,盐水稀释再为减少沉淀,盐水稀释再 4 4℃℃保存。保存。卵黄囊卵黄囊主要营养的储藏场所,为胚胎提供营养。主要营养的储藏场所,为胚胎提供营养。卵白卵白外于卵的锐端,为胚胎发育晚期提供营养。外于卵的锐端,为胚胎发育晚期提供营养。第二节第二节鸡胚的孵育和检查鸡胚的孵育和检查??受精鸡卵的供给受精鸡卵的供给——没有受到病毒和细菌的污染如新城鸡瘟病没有受到病毒和细菌的污染如新城鸡瘟病毒、布氏杆菌等; 毒、布氏杆菌等; ——培养立克次体和衣原体,不能来自食用抗培养立克次体和衣原体,不能来自食用抗生素的鸡群。生素的鸡群。??鸡胚的孵育鸡胚的孵育——温度为温度为 38 38~ ~39 39℃℃; ; ——湿度为湿度为 40 40% %-70 -70 %; %; ——翻蛋:防止蛋白粘连,促进羊膜运动和空翻蛋:防止蛋白粘连,促进羊膜运动和空气流通; 气流通; ——通风:排出通风:排出 CO CO 2 2和吸入和吸入 O O 2 2。。
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