植物生理学中各项生理指标的测定方法样稿.doc

试验1 MDA(丙二醛)含量测定所需试剂：
10%三氯乙酸（TCA）（纯） %硫代巴妥酸 (纯)
试验2：可溶性蛋白含量测定所需试剂：
考马斯亮蓝G-250 95%乙醇 85%磷酸
试验3：SOD(超氧化物歧化酶)酶活性测定所需试剂：
dl-甲硫氨酸（Met） NBT EDTA-Na2 核黄素
试验4：CAT(过氧化氢酶)活性（过氧化氢酶）测定所需试剂：
PBS（PH=） 30% H2O2
试验五：Apx(抗坏血酸过氧化物酶)活性（即ASA—POD活性）测定所需试剂：
ASA（） (乙=胺四乙酸=钠)EDTA—Na2 PBS () 30%H2O
试验6： ASA(维生素C)含量测定
偏磷酸 95%乙醇 磷酸 4% 2,2-二联吡啶 FeCl3（或FeCl3·6H2O）
试验7：GSH(谷胱甘肽, 媚力肽GSH GSH是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合而成三肽化合物)含量测定所需试剂：
NaH2PO4·2H2O DTNB（二硫代硝基苯甲酸） PBS ()
试验8：脯氨酸测定所需试剂：
磺基水杨酸 甲苯 茚三酮 冰乙酸 85%磷酸
试验9：叶绿素含量测定。
80%丙酮
试验9：GR活性测定
试验10：过氧化氢含量测定。
三氯乙酸
试验11：超氧阴离子含量测定
二．酶液和母液提取
1. 酶液提取所需试剂：50mmol/L磷酸缓冲液（PH=）(内含1% (m/v) 聚乙烯吡哆烷酮PVP），)，也可为（内含2% (m/v)PVP）， EDTA Na2或EDTA）（先配制后用缓冲液定容）
2. ASA . GSH母液提取所需试剂：5%偏磷酸
1．抗氧化酶酶液提取（）：
1g（依据样品量,少能够合适降低）叶片加入预冷5ml. 50mmol/L磷酸缓冲液（PH=）
↓
4℃冷冻15000g离心20分钟
↓
上清液即为酶液（5℃下保留一两天内备用，中短期用-20℃保留）
2．ASA . GSH母液提取：
%偏磷酸溶液
↓
4℃冷冻14000g离心10分钟
↓
上清液即为母液（5℃下保留备用）
（偏磷酸可显著沉淀蛋白质和保护ASA）
酶液提取所需试剂：
PVP（聚乙烯吡哆烷酮）：1%（1g溶于100ml水），1000ml需称取10g，此处用PBS
EDTA-Na 2 : ( EDTA-Na2溶于1000ml蒸馏水)，此处用PBS
PBS（缓冲液）配制方法：① Na2HPO4·12H2O ② NaH2PO4·2H2O
取① ，蒸馏水定容至1L，取② ，放置4℃冰箱备用
PH= 取① +② =100ml (