《实验诊断学》红细胞与白细胞数量测定实验精要.doc

《实验诊断学》实验报告实验一红细胞计数、白细胞计数学院: 专业年级: 学号: 姓名: 实验日期: 2015 一. 实验原理 ,充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经过换算求得每升血液中的红细胞数量。 ,成熟红细胞全被溶解,在显微镜下计数一定体积内白细胞数,换算出每升血液中白细胞数量。二. 实验内容与步骤 Neubauer 计数板、显微镜、盖玻片、试管、微量吸管、移液管、洗耳球、生理盐水、 RBC 稀释液、 WBC 稀释液(冰乙酸 3ml 、蒸馏 97ml 、10g/L 亚甲蓝溶液 3滴混合过滤后备用) (1)红细胞计数 1、取红细胞稀释液 毫升,放入一小试管内。 2、用微量吸管吸至 l0ul 处。 3 、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内, 上清液嗽洗吸管 2-3 次,立即摇匀。 4、将计数池与盖玻片用软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。 5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。 6、待 3~5 分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。红细胞计数的区域:中心大方格中的 5个中方格(正中一个和四角各一个)。计数原则:数上不数下,数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线) 上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。计算方式: RBC/L =5个中方格内 RBC 数×5×10×200 ×10 6 =5个中方格内 RBC 数/100 ×10 12 参考值: 男性: ( ~) ×10 12 /L 女性: ( ~) ×10 12 /L 新生儿: ( ~) ×10 12 /L (2)白细胞计数 1、取小试管一支,加白细胞稀释液 。 2、用微量吸管准确吸收末梢血 20ul , 擦去管外余血,将吸管插入试管中稀释液底部,轻轻将血液放出,并吸取上清液清洗吸管两次,混匀。 3、待红细胞完全破坏,液体变为棕褐色后,再次混匀后充池,静置 2~3min , 待白细胞下沉。 4、用低倍镜计数四角 4个大方格内的白细胞数,对压线细胞按“数上不数下、数左不数右”的原则进行计数。计算方式: WBC/L = (4个大方格内 WBC 数/4) ×10×20×10 6 = (4个大方格内 WBC 数/20) ×10 9 参考区间: 成年男性:( ~ )×10 9 /L 成年女性:( ~ )×10 9 /L 儿童:( 8~10 )×10 9 /L 婴儿:( 11~12 )×10 9 /L 新生儿: 20×10 9 /L 三. 实验结果红细胞计数实验结果如下图: 左上角方格右上角方格右下角方格左下角方格正中方格表一红细胞分类计数表左上角方格右上角方格右下角方格左下角方格正中方格 42130 224 8480 RBC/L = 5个中方格内 RBC 数× 5× 10× 200 × 10 6 = 5个中方格内 RBC 数/100 × 10 12 =( 42+130+224+84+80 ) /100 × 10 12 = × 10 12 本实验使用的血液标本来