高效液相色谱分析.ppt

一、HPLC与经典LC区别
主要区别:固定相差别输液设备和检测手段
:仅做为一种分高手段
柱内径1~3cm,固定相粒径>100m且不均勻
常压輸迭流动相
柱效低(H↑,n)
分析周期长
无法在线检测
:分禽和分析
柱内径2~6mm,固定相粒径<10m(礅形,均勻装柱
高压輸迭流动相
柱效高(H!,n)
分析时间大大缩短
可以在线检测
二、HPLG与G差别
相同:兼具分离和分析功能,均可以在线检测
主要差别:分析对象的差别和流动相的差别

GC:能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品,
高沸点、挥发性差、热稳定性差、
离子型及高聚物的样品不可检测
占有机物的20%
HPLc:溶解后能制成溶液的样品,
不受样品挥发性和热稳定性的限制
相对分子疯量大、难气化、热稳定性差及高分子
和高子型样品均可检测
用途广泛,占有机物的80%

令GC:流动相为性气体
组分与流动相无亲合作用力,只与固定相作用
HPLC:流动相为液体
流动相与组分间有亲合作用力。为提高柱的选择性,
改善分高度增加了因素,对分高患很大作用
流动相种类校多,选择余地厂
流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用
选用不同比例的两种两种以上液体作为流动相
可以增大分高选择性

GC:加温操作
HPLc:室温;高压(液体粘度大,峰展宽小)
提高桂内填料装壤的均匀性,减小粒度
、高效液相色谱仪流程图
(滤去颗粒状物质)
(15000~35000KPa)流量稳定
贮液器力:
及梯度洗提装置
试,样

输被系统
x[

色(
清|
灵敏度高,量复性好
组分
记录仪
、线性范国宽、死体
检测器
收集器
數据处理机积小以及对温度和流
量的变化不敏感
图194高效液相色谱仪结构方块图
高效液相色谱仪的色谱柱
内径:;长度:15~30cm
HYPERSIL
填料颗粒度:3~5μm
湿法匀浆装柱技术
不规则形填料
球形填料
HPLc柱=空柱管+填料(分离介质)
价格?
空柱管:200-300元
国产填料国产装填=800-1000元
进口填料国产装填
1200-1500元
原装进口柱
2400-3000元
检测器:紫外光度检测器、荧光检测器、
示差折光检测器、电导检测器
蒸发光散射检测器
高效液相色谱仪的生产厂家
Waters
Agilent
大连依利特公司
Perkin elmer
造谷
戴安
北京东西电子研究所
Varian
Shimada
Agilent1100系列液相色谱系统