色谱柱的使用说明模板.doc

色谱柱使用说明：
（1）色谱柱使用前注意事项：
色谱柱储存液无特殊说明，均为评价汇报所表示流动相。在使用前，一定要注意色谱柱储存液和要分析样品流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右低浓度有机相洗脱剂过渡一下，不然缓冲液中盐在高浓度有机相中很轻易析出，堵塞色谱柱。
（2）流动相：
流动相中所使用多种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相水最好是超纯水或全玻璃器皿双蒸水。，尤其是含盐流动相。另外，装流动相容器和色谱系统中在线过滤器等装置应该定时清洗或更换。
-，BDS C18适合于碱性化合物，-。当必需要在PH值适用范围边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并和所使用流动相互溶溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用流动相。
（3）样品：
样品也要尽可能清洁，可选择样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，全部溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱保留  
（1）反相色谱柱天天试验后保养：
使用缓冲液或含盐流动相，试验完成后应用10%甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%甲醇，预防将填料冲塌陷。
（2）长久保留色谱柱：
如色谱柱要长时间保留，必需存于适宜溶剂下。对于反相柱能够储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱能够储存于严格脱水后纯正己烷中，离子交换柱能够储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购置新色谱柱时附送堵头堵上。储存温度最好是室温。
3、色谱柱再生  
因为色谱柱是消耗品，伴随使用时间或进样次数增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰现象，通常来说可能是柱效下降。
（1）反相柱再生：依次采取20-30倍色谱柱体积甲醇：水=10：90 （V/V），乙腈，异丙醇作为流动相冲洗色谱柱，完成后再以相反次序冲洗色谱柱。
（2）正相柱再生：依次以20-30倍色谱柱体积正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作为流动相冲洗色谱柱，然后再以相反次序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。
4、色谱柱在使用过程中易出现问题和处理措施  
色谱柱在使用中最常见问题就是柱压升高，假如柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中忽然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能原因有以下几点：
（1）色谱柱头过滤筛板堵塞或污染；
（2）色谱柱头填料被样品污染；
（3）色谱柱内缓冲液中盐碰到高浓度甲醇或其它有机溶剂，形成结晶析出；
（4）流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。
处理措施以下：
（1）如确定是色谱柱头过滤筛板被污染，能够将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或卸下色谱柱头，将其放在10％稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声10分钟，重新装入色谱柱。
（2）如确定色谱柱头填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染填料，用相同柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头